Russian Federation
GRNTI 68.41 Ветеринария
It is necessary to use the achievements of molecular genetics, based on the selection of DNA markers, so that to manage the biodiversity of farm animals and the distribution of utility indicators of productivity among cattle populations. The leptin gene, which plays a major role in the metabolism and accumulation of fat, is one of the potential markers of the dairy productivity of cattle. For the study, 301 first-calf cow of Holstein breed was genotyped by “Lenin tribal factory” of Atninskiy district of the Republic of Tatarstan. The variability of the alleles of the leptin gene of cattle was monitored, depending on the direction of productivity of different authors. During the work, the following allelic variants and genotypes were identified: C - 0.58 and T - 0.42; CC - 29.9% (90 heads), TC - 55.5% (167 heads), TT - 14.6% (44 heads). Chi-square test between the observed and expected distribution of genotypes indicates a genetic equilibrium in the studied population. Analysis of ranking of C and T alleles in other authors showed a predominance of LEPC allele, which is favorable for evaluation of milk and meat productivity, which can be the result of targeted selection for the desired economic utility among dairy and meat breeds of cattle. The data obtained in the course of the work suggest the possibility of using genetic marker breeding when drawing up livestock management plans.
leptin, allele, genotype, polymorphism, RFLP - Restriction Fragment Length Polymorphism, productivity, selection, cattle.
Для устойчивого генетического улучшения и удовлетворения потребностей населения страны в различных областях необходимо генетическое разнообразие сельскохозяйственных животных. Основные вопросы управления биоразнообразием включают в себя распределение потенциально полезных качественных и количественных признаков продуктивности среди пород и популяций. Достижения современной молекулярной генетики сделали возможным идентифицировать гены, связанные с качественными и количественными признаками крупного рогатого скота, отбирать предпочтительные с точки зрения хозяйственного использования аллельные варианты таких генов и создавать на их основе информативные ДНК-маркеры [1]. Одними из потенциальных маркеров молочной и мясной продуктивности крупного рогатого скота могут рассматриваться аллели генов лептина (LEP) [2].
Лептин – гормон, вырабатываемый адипоцитами – клетками жировой ткани, играют важную роль в метаболизме, в частности, в накоплении жира в организме, вовлечен в регуляцию пищевого поведения, влияет на функционирование иммунной системы и репродуктивную функцию, а также на рост и конституцию животных. У крупного рогатого скота LEP расположен в хромосоме 4q32. Он состоит из 3 экзонов и 2 интронов, из которых только 2 экзона транслируются в белок [3]. Структурно лептин представляет собой протеин, состоящий из 167 аминокислот и включающий 21 аминокислотную сигнальную последовательность [4]. Благоприятный для оценки мясной и молочной продуктивности аллель LEPС [5].
Целью настоящего исследования являлось генотипирование коров-первотелок голштинской породы с использованием метода ПЦР-ПДРФ и мониторинг вариабельности аллелей по локусу гена лептина среди крупного рогатого скота различного направления продуктивности.
Условия, материалы и методы исследований. Образцы проб крови были получены от 301 коровы-первотелки голштинской породы СХПК «ПЗ им. Ленина» Атнинского района Республики Татарстан. Очищенные ДНК в составе реакционной смеси амплифицировали на аппарате T100 Thermal Cycler (Bio-Rad, США) в оптимальном температурно-временном режиме с использованием праймеров (СибЭнзим и Евроген, Россия) согласно инструкциям производителей.
Электрофоретическое разделение ПЦР-продуктов осуществлялось в агарозном 2,6%-ном геле в присутствии этидиума бромида в 1х ТВЕ буфере. Регистрация полученных данных проводилась при помощи системы гель-документирования Gel&Doc XR (BioRad, США). Генетическое равновесие в изучаемой популяции тестировали методом хи-квадрат согласно закону Харди-Вайнберга.
1. Sulimova G.Ye., Perchun A.V., Ruzina M.N., Lazebnaya I.V. Perspektivy ispolzovaniya kostromskogo skota v molochnom i myasnom zhivotnovodstve. / 70 let kostromskoy porode skota: sbornik statey. [Prospects of Kostroma cattle using in dairy and meat cattle breeding. / 70 years of Kostroma breed of cattle: a collection of articles]. - Karavaevo: Kostromskaya GSKhA, 2014. - P. 62-71.
2. Machulskaya E.V. Svyaz genotipov LEP s plemennoy tsennostyu po pokazatelyam molochnoy produktivnosti. / E.V. Machulskaya, N.V. Kovalyuk, Yu.Yu. Shakhnazarova, V.F. Satsuk, A.A. Sermyagin, A.V. Dotsev // Nauchnye osnovy povysheniya produktivnosti selskokhozyaystvennykh zhivotnykh. Sbornik nauchnykh trudov SKNIIZh. (Relationship of LEP genotypes with breeding value by indicators of milk productivity. Scientific foundations for increasing the productivity of farm animals. Collection of scientific works of North Caucasian Research Institute of Animal Husbandry). Krasnodar, 2017. - Vol. 1. - № 6. - P. 82-88.
3. Kalashnikova L.A. Rekomendatsii po genomnoy otsenke krupnogo rogatogo skota. [Recommendations for the genomic evaluation of cattle]. / L.A. Kalashnikova and others. - Lesnye Polyany: VNIIplem, 2015. - P. 35.
4. Komisarek, J. Impact of LEP and LEPR gene polymorphismos functional traits in Polish Holstein Friesian cattle/ J. Komisarek// Animal Science Paper and Reports. 2010. - Vol. 10. - PP. 133-141.
5. Moldakarimov A., Buralkhiev B.A. Polimorfizm genov produktivnosti krupnogo rogatogo skota i sovremennye strategii ikh issledovaniya. / Besplatnaya internet biblioteka - elektronnye materialy. (Polymorphism of the genes of cattle productivity and modern strategies for their research. / Free online library - electronic ptoceedings). - Available at: www.lib.knigi-x.ru (date of access: 19.09.2017).
6. Zinnatova F.F. Izuchenie svyazi gena leptin (LEP) s molochnoy produktivnostyu u korov golshtinskoy porody s primeneniem PDRF - analiza. / F.F. Zinnatova, A.R. Shamsova, F.F. Zinnatov, A.R. Safiullina, L.L. Khamitova // Sborn. konf.: Fundamentalnaya nauka i tekhnologii - perspektivnye razrabotki materialy XII mezhdunarodnoy nauchno-prakticheskoy konferentsii. (Study of the connection of the leptin gene (LEP) with milk productivity in Holstein cows using RFLP analysis. // Collected. Conf .: Fundamental science and technology - advanced proceedings of XII international scientific and practical conference). 2017. P. 1-3.
7. Tyulkin S.V., Akhmetov T.M, Muratova A. V., Vafin R. R. Characteristics of bulls-producers with different genotypes of genes of somatotropin, prolactin, leptin and thyroglobulin on milk productivity of female ancestors. [Kharakteristika bykov-proizvoditeley s raznymi genotipami genov somatotropina, prolaktina, leptina i tireoglobulina po molochnoy produktivnosti zhenskikh predkov]. Aktualnye voprosy veterinarnoy biologii. - Actual questions of veterinary biology. SPb. - 2013. - № 1 (17). - P. 27-30.
8. Kadlecová V.,Němečková D., Ječmínková K., Stádník L. Association of bovine DGAT1 and leptin genes polymorphism with milk production traits and energy balance indicators in primiparous Holstein cows / Milk production traits, Mljekarstvo, Czech Republic. 2014. - 64 (1), PP. 19-26.
9. Rachkova E.N. Association of polymorphism of TG5 and LEP genes with dynamics of lactation of first-ante cows. / Rachkova F.F. Zinnatova, Yu.R. Yulmeteva, T.M. Akhmetov, Sh.K. Shakirov // [Assotsiatsiya polimorfizma genov TG5 i LEP s dinamikoy laktatsii korov-pervotelok]. // Veterinarnyy vrach. - Veterinary physician 2016. - № 6. - P. 61-66.
10. Kovalyuk N.V., Gyrnets E.A. Polimorfizm alley gena LEP kak geneticheskiy marker funktsionalnogo dolgoletiya krupnogo rogatogo skota. // Universum: Khimiya i biologiya: elektron. nauchn. zhurn. (Polymorphism of the LEP gene alleles as a genetic marker of functional longevity of cattle). // Universum: Chemistry and biology: electronic scientific journal. - №6 (24). - Available at: http://7universum.com/ru/nature/archive/item/3257 (date of access: 19.09.2017).
11. Abeldinov R.B., Bekseitov T.K. Hematologic and biochemical indices of blood of Simmental breed cows of Kazakhstan breeding with different genotype for candidate genes of lipid metabolism. [Gematologicheskie i biokhimicheskie pokazateli krovi korov simmentalskoy porody kazakhstanskoy selektsii s razlichnym genotipom po genam-kandidatam lipidnogo obmena]. / Vestnik Altayskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - The Herald of Altai State Agrarian University. 2017. - № 2 (148). - P. 69-71.
12. Jomane F.N. Genetic Polymorphisms and Their Association with Growth and Carcass Traits in Japanese Black Steers under Progeny Testing / F.N. Jomane, T.Ishida, K. Morimoto, N. Fujishita, T. Tokunaga, H. Harada, T. Morita // Journal of Warm Regional Society of Animal Science, Japan/ 2015. - Vol. 5 (2). - PP. 217-224.
13. Souza, F.R.P. DGAT1 and LEP polymorphisms in Nelore cattle/ Souza et al. // Animal Science. 2010. - Vol. 88. - PP. 435-441.
14. Hernández N. Association of polymorphisms in growth hormone and leptin candidate genes with live weight traits of Brahman cattle / N. Hernández, J.C. Martínez-González, G.M. Parra-Bracamonte2, A.M. Sifuentes-Rincón, N. López-Villalobos, S.T. Morris, F. Briones-Encinia, E. Ortega-Rivas, V.I. Pacheco-Contreras, L.A. Meza-García // Genetics and Molecular Research. 2016. - Vol. 15 (3). - DOI http://dx.doi.org/10.4238/gmr.15038449.
15. Buchanan F.C. Association of a missense mutation in the bovine leptin gene with carcass fat content and leptin mRNA levels / F.C. Buchanan, C.J. Fitzsimmons, A.G. Van Kessel, T.D. Thue, D.C. Winkelman-Sim, Sh.M. Schmutz // Genetic Selection Evolution. 2002. - Vol. 34. - PP. 105-116. - DOI:https://doi.org/10.1051/gse:2001006.
16. Nkrumah J.D. Association of a single nucleotide polymorphism in the bovine leptin gene with feed intake, feed efficiency,growth, feeding behaviour, carcass quality and body composition / J.D. Nkrumah, C. Li, J.B. Basarab, S. Guercio, Y. Meng, B. Murdoch, C. Hansen, S.S. Moore // Canadian Journal Of Animal Science. 2003. - Vol. 9. - PP. 211-220.
17. Yulmeteva Yu.R., Shakirov Sh.K., Zinnatova F.F. Genotipirovanie plemennogo skota po genam-kandidatam molochnoy produktivnosti v Respublike Tatarstan. // Sovremennye tekhnologii vyraschivaniya selskokhozyaystvennykh kultur: materialy Vseros. zaochnoy nauch.-prakt. konf.molodykh uchenykh, posvyasch. pamyati R.G. Gareeva. (Genotyping of breeding cattle on candidate genes of dairy productivity in the Republic of Tatarstan. // Modern technologies of agricultural crops cultivation: proceedings of All-Russian extramural scientific-practical conference of young scientists, dedicated to the memory of R.G. Gareev). - Kazan: Tsentr innovatsionnykh tekhnologiy, 2015. - P. 300-304.
18. Gil J.L. Association of selected SNP with carcass and taste panel assessed meat quality traits in a commercial population of Aberdeen Angus-sired beef cattle / J.L. Gill, S.C. Bishop, C.M. Corquodale, J.L. Williams, P. Wiener // Genetics Selection Evolution. 2009. - Vol. 6. - DOIhttps://doi.org/10.1186/1297-9686-41-36.
19. Sharipov A.A., Yulmeteva Yu.R., Shakirov Sh.K., Gafurova L.I. Molecular-genetic aspects of beef cattle selection for marbling meat. [Molekulyarno-geneticheskie aspekty selektsii myasnogo skota po mramornosti myasa]. / Vestnik myasnogo skotovodstva. - The Herald of beef cattle. 2014. - № 2(85). - P. 59-64.
20. Pavlík A., Sláma P., Havlíček Z., Filipčík R. Metabolic parameters concentrations in blood serum of Czech Pied bulls depending on single nucleotide polymorphism of leptin gene / Journal of Microbiology, Biotechnology and Food Sciences. 2014. - Vol.3, Issue 2. - PP. 145-147.
