Cel': Issledovat' vliyanie ekstrakta griba Lecanicilium lecanii na aktivnost' 15-lipoksigenazy (15-LO) i radiacionnyy apoptoz timocitov krys. Material i metody: Ekstrakt poluchali pri obrabotke griba Lecanicilium lecanii acetonom. Aceton udalyali, a osadok rastvoryali v etanole. Timocity krys Vistar podvergalis' vozdeystviyu rentgenovskogo izlucheniya v doze 6 Gr i inkubirovali 6 ch v pitatel'noy srede. Apoptoz timocitov registrirovali po povrezhdeniyu yader i fragmentacii DNK. 15-LO vydelyali iz retikulocitov krys Vistar. Aktivnost' 15-LO opredelyali po okisleniyu linolevoy kisloty. Rezul'taty: Ekstrakt griba podavlyal aktivnost' 15-LO. Koncentraciya ekstrakta, snizhayuschaya aktivnost' 15-LO na 50 % (IC50) sostavila 15 mkg/ml. Posle oblucheniya timocitov dolya povrezhdennyh yader uvelichivalas' do 67 %. Dobavlenie ekstrakta srazu posle oblucheniya snizhalo procent povrezhdennyh yader i fragmentaciyu DNK v obluchennyh timocitah. Effekt uvelichivalsya s rostom koncentracii ekstrakta, i pri doze ekstrakta 50 mkg/ml procent povrezhdennyh yader v obluchennyh timocitah padal do kontrolya (16 %), a fragmentaciya DNK snizhalas' do urovnya nizhe kontrol'nogo. IC50 ekstrakta po snizheniyu povrezhdeniya yader ravna 6 mkg/ml. Vyvody: Poluchennye dannye pokazyvayut, chto ekstrakt griba Lecanicilium lecanii soderzhit effektivnyy ingibitor 15-LO.
apoptoz, timocity, radiaciya, 15-lipoksigenaza
Одним из существенных факторов, осложняющих успешную лучевую терапию опухолей, является пострадиационный иммунодефицит, обусловленный гибелью лимфоидных клеток. Особенно чувствительны к облучению тимоциты – предшественники зрелых Т-клеток. Облучение инициирует в них гибель по типу апоптоза. Известно, что продукты 15‑липоксигеназы (15‑ЛО) необходимы для запуска апоптоза при некоторых воздействиях в разных типах клеток. Радиационный апоптоз тимоцитов подавляется общим ингибитором липоксигеназ нордигидрогваяретовой кислотой (НДГК), но не специфическими ингибиторами 5 и 12-липоксигеназ. Показана активация 15‑ЛО в течение часа после облучения.
1. Maccarrone M., Ranalli M., Bellincampi L. et al. Activation of different lipoxygenase isozymes induces apoptosis in human erythroleukemia and neuroblastoma cells Biochem. Biophys. Res. Com. 2000. Vol. 272. № 2. P. 345-350.
2. Sandstrom P.A., Pardi D., Tebbey P.W. et al. Lipid hydroperoxide-induced apoptosis: lack of inhibition by Bcl-2 over-expression FEBS Lett. 1995. Vol. 365. № 1. P. 66-70.
3. Grichenko O.E., SHaposhnikova V.V., Levitman M.H. i soavt. Issledovanie roli lipoksigenaz v radiacionnom apoptoze timocitov // Radiac. biol. Radioehkologiya. 2004. T. 44. № 1. S. 27-31. (In Russian).
4. Matyshevskaya O.P., Pastuh V.N., Solodushko V.A. Ingibirovanie lipoksigenaznoj aktivnosti snizhaet inducirovannuyu radiaciej fragmentaciyu DNK limfocitov // Radiac. biol. Radioehkologiya. 1999. T. 39. № 2-3. S. 282-286. (In Russian).
5. Shaposhnikova V.V., Dobrovinskaya O.R., Eidus L.Kh., Korystov Y.N. Dependence of thymocyte apoptosis on protein kinase C and phospholipase A2 FEBS Lett. 1994. Vol. 348. № 3. P. 317-319.
6. Grichenko O.E., Pushin A.S., SHaposhnikova V.V. i soavt. Issledovanie aktivnosti 15-lipoksigenazy v timocitah posle oblucheniya // Izv. AN. Seriya biol. 2004. № 5. S. 1-5. (In Russian).
7. Puzhevskaya T.O., Bibikova M.V., Grammatikova N.EH., Katlinskij A.V. Vliyanie prirodnyh gipolipidemicheskih soedinenij na formirovanie bioplyonok shtammami roda Pseudomonas // Antibiotiki i himioterapiya. 2009. T. 54. № 1. S. 10-13. (In Russian).
8. Rapoport S.M., Schewe T., Wiesner R. et al. Purification, characterization and biological dynamics of the lipoxygenase; its identity with the respiratory inhibitors of the reticulocyte // Eur. J. Biochem. 1979. Vol. 96. № 3. P. 545-561.
9. Meshkova N.P., Severin S.E. Praktikum po biohimii. - M.: MGU. 1979. 430 s. (In Russian).
