Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Metodom gazozhidkostnoy hromatografii proizvedeno izuchenie soderzhaniya ω-3 polinenasyschennoy eykozapentaenovoy kisloty v plazme perifericheskoy krovi beremennyh pervogo trimestra s citomegalovirusnoy (CMV) infekciey v zavisimosti ot specificheskogo titra antitel IgG k CMV. V issledovanie voshli 135 beremennyh, kotorye byli raspredeleny po gruppam. Vydelena gruppa sravneniya v kolichestve 45 zdorovyh beremennyh s fiziologicheskim techeniem pervogo trimestra gestacii. Velichiny izuchaemyh pokazateley, poluchennye v dannoy gruppe, byli ispol'zovany v kachestve otpravnoy tochki sravneniya kak fiziologicheski normal'nye znacheniya. V sostav gruppy issledovaniya voshli 90 beremennyh s obostreniem hronicheskoy CMV infekcii v pervom trimestre, razdelennye na dve podgruppy, v zavisimosti ot titra antitel IgG k CMV: podgruppa A (45 zhenschin s aktivnoy formoy CMV infekcii, titr antitel IgG k CMV 1:1600); podgruppa B (45 zhenschin s latentnoy formoy CMV infekcii, titr antitel IgG k CMV 1:800). Na osnove poluchennyh dannyh ustanovleno, chto reaktivaciya CMV infekcii v pervom trimestre gestacii privodit k snizheniyu v plazme perifericheskoy krovi zhenschin koncentracii ω-3 polinenasyschennoy eykozapentaenovoy kisloty na 30% (p<0,001) v podgruppe A i na 18% (p<0,01) v podgruppe B, po sravneniyu s analogichnym pokazatelem kontrol'noy gruppy. Dannaya dinamika izmeneniy eykozapentaenovoy kisloty v plazme perifericheskoy krovi beremennyh s CMV infekciey zavisit ot specificheskogo titra antitel IgG k CMV i naibolee vyrazhena pri aktivnoy forme CMV infekcii (titr antitel IgG k CMV 1:1600). Dal'neyshee issledovanie urovnya svobodnyh polinenasyschennyh zhirnyh kislot ω-3 semeystva v period beremennosti mozhet pozvolit' razrabotat' terapiyu dlya svoevremennoy korrekcii perinatal'noy patologii, sposobnuyu predotvraschat' gibel' kletok i uluchshat' pokazateli zdorov'ya v posleduyuschie periody zhizni novorozhdennyh
beremennost', citomegalovirusnaya infekciya, perifericheskaya krov', eykozapentaenovaya kislota.
Проблема цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции сохраняет актуальность в настоящее время. Необходимость изучения данной патологии обусловлена ее широким распространением и тем, что ЦМВ способен вызывать различные нарушения у развивающегося плода и новорожденных детей, матери которых во время беременности перенесли ЦМВ инфекцию [3]. При наличии последней возможно развитие бессимптомной инфекции без последствий для беременности. Однако в большинстве случаев отмечается задержка внутриутробного созревания, гипотрофия и гипоксия плода [4. 11]. ЦМВ инфекция влияет на критические аспекты функции трофобласта, что объясняет негативное воздействие данного вируса на течение и исход беременности [12].
За последние два десятилетия накоплены данные, указывающие на важную роль полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) ɷ-3 семейства в нормальном развитии и поддержании баланса между физиологическими и патологическими процессами в организме, в том числе, при беременности. Являясь субстратом для производства цитокинов, некоторых гормонов, ɷ-3 ПНЖК служат сигнальными регуляторными молекулами, участвующими в построении миелиновых оболочек, клеточных мембран, обеспечении их функциональности, регуляции проницаемости, текучести, эластичности, являются активаторами нормального деления клеток, синтеза регуляторных белков, отвечают за когнитивные функции [1]. Эйкозапентаеновая кислота (ЭПК) важна как на перинатальном этапе беременности, так и для обеспечения здоровья плода на протяжении всего цикла. Она относится к ω-3 ПНЖК, из которых образуются защитные противовоспалительные эйкозаноиды, а недостаточное содержание ее в крови матери, может быть причиной различного рода осложнениям гестационного периода.
Целью настоящей работы явилось изучение динамики изменений концентрации ЭПК в сыворотке периферической крови беременных при реактивации хронической ЦМВ инфекции в первом триместре в зависимости от специфического титра антител класса G к ЦМВ.
Материалы и методы исследования
В исследование вошли 135 беременных, которые распределили по группам. Выделена группа сравнения в количестве 45 здоровых беременных с физиологическим течением первого триместра гестации. Величины изучаемых показателей, полученные в данной группе, были использованы в качестве отправной точки сравнения как физиологически нормальные значения. В состав исследуемой группы вошли 90 беременных с обострением хронической ЦМВ инфекции в первом триместре, разделенные на две подгруппы, в зависимости от титра антител IgG к ЦМВ: подгруппа А (45 женщин с активной формой ЦМВ инфекции, титр антител IgG к ЦМВ 1:1600); подгруппа Б (45 женщин с латентной формой ЦМВ инфекции, титр антител IgG к ЦМВ 1:800). По значимым параметрам (возраст, акушерско-гинекологический анамнез, наличие других соматических заболеваний) на момент обследования сравниваемые группы достоверно не отличались.
Критерием включения в основную группу являлся лабораторно подтвержденный молекулярно-биологическими и серологическими методами исследования рецидив ЦМВ инфекции в первом триместре гестации, наличие в периферической крови женщины на момент исследования титра антител IgG к ЦМВ 1:800 и 1:1600, стойкая клиническая ремиссия герпесвирусной инфекции. К критериям исключения относили первичную ЦМВ инфекцию, обострение других воспалительных заболеваний экстрагенитальной патологии и инфекций, передающихся половым путем. Рецидив ЦМВ инфекции устанавливали на основании результатов комплексного исследования периферической крови: при наличии антител класса М или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG к ЦМВ в парных сыворотках в динамике через 10 суток; при индексе авидности антител IgG к ЦМВ более 75%, а также в случае выявления ДНК ЦМВ методом ПЦР в крови, моче, в соскобах с буккального эпителия и слизистой оболочки шейки матки.
Материалом для исследований служила плазма периферической крови. У женщин исследуемых групп в сыворотке крови методом газожидкостной хроматографии изучали содержание ЭПК. Метилирование осуществляли по методу J.P.Carreau, J.P.Dubacq [10]. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2.5 по временам удерживания с использованием стандартов фирмы «Supelco» (США). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных %) в общей сумме площадей пиков метилированых продуктов высших ЖК.
Обследование беременных женщин проводилось с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта» с поправками 2013 г. и нормативных документов «Правила надлежащей клинической практики в Российской Федерации», утвержденных Приказом №200 от 01.04.2016 МЗ РФ. Исследование одобрено комитетом по биомедицинской этике ДНЦ ФПД и выполнено с согласия пациенток.
Статистическая обработка и анализ данных осуществлялась с использованием стандартного пакета прикладных программ Statistica 6.ж1 Stat-Soft Jnc, США. Анализируемые в работе количественные данные имели нормальное распределение, поэтому рассчитывалась достоверность различий значений по Стьюденту − вычисление средней арифметической (М), средней ошибки (m). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы p принимался равным 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
При анализе полученных данных обращало на себя внимание снижение концентрации ЭПК до 0,96±0,03% (p<0,001) в подгруппе А и до 1,18±0,04 (p<0,01) в подгруппе Б, по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы (1,32±0,02%). Представленные результаты свидетельствуют о значимых различиях в содержании ЭПК у беременных контрольной группы и групп сравнения. Наиболее выражена динамика изменений концентрации ЭПК у женщин с титром антител IgG к ЦМВ 1:1600.
Снижение концентрации ЭПК у беременных с ЦМВ инфекцией можно объяснить активацией процессов перекисного окисления липидов, которые в данных условиях находятся на достаточно высоком уровне [2] и образующиеся в ходе свободно-радикальных реакций активные формы кислорода разрушают ненасыщенные ЖК с наибольшим числом двойных связей.
Являясь предшественником эйкозаноидов, в том числе простагландинов и лейкотриенов, ЭПК влияет на сопротивляемость организма инфекциям [6]. Из ЭПК образуются продукты, которые оказывают ингибиторное действие на провоспалительные вещества арахидонового каскада [5]. Эйкозаноиды, синтезируемые из ЭПК, обладают антитромботическим действием, способностью регулировать сосудистый тонус. Являясь структурным компонентом биологических мембран клеток ПНЖК ω-3 семейства (ЭПК и докозагексаеновая кислота) оказывают непосредственное влияние на текучесть липидного бислоя, проницаемость мембран, мембраносвязанную ферментативную активность, функционирование мембранных рецепторов и распознавание антигенов, электрофизиологические свойства мембран [7].
Свободная ЭПК модифицирует – ингибирует функции трансмембранных ионных каналов всех органов и тканей, усиливает эффективность антиоксидантных систем организма, нормализует процессы транспорта липидов в кровяном русле, репарацию клеточных мембран, активацию иммунокомпетентных клеток, способствует улучшению всасывания жиров в желудочно-кишечном тракте [8]. При дефиците в клетках ω-3 ПНЖК меняется синтез и биологическая активность эйкозаноидов, которые изменяют секрецию одновалентных катионов в канальцах почек, активируют агрегацию тромбоцитов и воспаление [9].
Следовательно, достаточное поступление ЭПК во время беременности и в ранний неонатальный период принципиально важно для последующего функционирования организма ребенка. Недостаток ЭПК может привести к неблагоприятным последствиям для плода и новорожденного ребенка.
Таким образом, реактивация ЦМВ инфекции в первом триместре гестации приводит к снижению в плазме периферической крови женщин концентрации ЭПК, из которой синтезируются простаноиды, способствующие уменьшению противовоспалительных эйкозаноидов. Данная динамика изменений ЭПК в плазме периферической крови беременных с ЦМВ инфекцией зависит от специфического титра антител IgG к ЦМВ и наиболее выражена при активной форме ЦМВ инфекции (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600). Дальнейшее исследование уровня свободных ПНЖК ω-3 семейства в период беременности может позволить разработать терапию для своевременной коррекции перинатальной патологии, способную предотвращать гибель клеток и улучшать показатели здоровья в последующие периоды жизни новорожденных.
1. Davidyan O.V., Vorslov L.O. Omega-3 polyunsaturated fatty acids as a source of longevity. Vopr. dietol. (Nutrition) 2017; 7(1): 36-41 (in Russian). doi:https://doi.org/10.20953/2224-5448-2017-1-36-41
2. Ishutina N.A., Dorofienko N.N. Lipid peroxidation in pregnancy complicated by cytomegalovirus infection. Bulleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2014; 54:66-69 (in Russian).
3. Korotkova N.A., Prilepskaya V.N. Cytomegalovirus infection and pregnancy (pregravid preparation and therapy). Effektivnaya farmakologiya 2016; 22: 28-32 (in Russian).
4. Lutsenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A., Mironenko A.G. Mechanisms of hypoxia development during pregnancy and the disorder of fetus blood supply at cytomegalovirus infection. Vestnik Rossiyskoy Akademii Meditsinskikh Nauk 2015; 70(1):106-112 (in Russian). doi:https://doi.org/10.15690/vramn.v70i1.1239
5. Nazarov P.E., Miagkova G.I., Groza N.V. Polyunsaturated fatty acids as universal endogenous bioregulators. Review MITHT 2009; 4(5):3-19 (in Russian).
6. Sofronov V.V., Agafonova E.A., Sharipova O.V., Schegurova D.I., Babintseva A.A., Abramzon N.A. Feature long-chain polyunsaturated fatty acids newborn at risk and their mothers. Vestnik sovremennoy klinicheskoy meditsiny 2013; 6(Suppl.2):27-31 (in Russian).
7. Tapil'skaya N.I., Gaydukov S.N. Evaluation of the significance of folate and polyunsaturated fatty acids deficiency during pregnancy and lactation, in consideration of evidence-based medicine. Effektivnaya farmakologiya 2013; 36:12-22 (in Russian).
8. Titov V.N. Disturbance of transport to cells of saturated fatty acids in the pathogenesis of essential hypertension (literature review). Klinicheskaya laboratornaya diagnostika 1999; 2:3-9 (in Russian).
9. Shilina N.M., Kon' I.Ya. Modern ideas about the physiological and metabolic functions of polyunsaturated fatty acids. Voprosy detskoy dietologii 2004; 2(6):25-30 (Russian).
10. Carreau J.P., Dubacq J.P. Adaptation of a macro-scale method to the micro-scale for fatty acid methyl transesterification of biological lipid extracts. J. Chromatography 1978; 151(3):384-390. https://doi.org/10.1016/S0021-9673(00)88356-9
11. Emery V.C., Lazzarotto T. Cytomegalovirus in pregnancy and the neonate. F1000Res. 2017; 6:138. doi:https://doi.org/10.12688/f1000research.10276.1
12. Fisher S., Genbacev O., Maidji E., Pereira L. Human cytomegalovirus infection of placental cytotrophoblasts in vitro and in utero: implications for transmission and pathogenesis. J. Virol. 2000; 74(15): 6808-6820.
