п.г.т. Усть-Кинельский, Самарская область, Россия
п.г.т. Усть-Кинельский, Самарская область, Россия
п.г.т. Усть-Кинельский, Самарская область, Россия
ГРНТИ 68.39 Животноводство
ОКСО 36.03.02 Зоотехния
Цель исследований − совершенствование селективной добавки к элективным средам для выделения энтеробактерий. Задачи исследований − выявить чувствительность выделенных штаммов энтеробактерий к антибиотикам; разработать новую селективную добавку с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar. Среды должны иметь рецептуру, оптимально обеспечивающую рост и размножение микроорганизмов определённого вида или семейства. Интенсивное развитие био-технологии и микробиологии позволяет сегодня разрабатывать новые питательные среды и модифицировать уже имеющиеся рецептуры сред. Объект исследования – новая селективная добавка с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar. Материал для исследований – 253 изолята бактерий, выделенных из кишечного микробиотопа различных видов животных. Исследование проводили в период с 2010 по 2017 гг. Наибольшую антимикробную активность в отношении всех выделенных культур энтеробактерий проявляли карбенициллин 30±2,3 из группы карбоксипенициллинов и пиперациллин 37±2,5 из группы уреидопенициллинов, канамицин 24±1,5, амикацин 26±1,7 и гентамицин 25±0,8, цефепим 38±3,2 из группы цефалоспоринов IV поколения, тетрациклин 28±1,6, доксициклин 34±2,3 и хлорамфеникол 31±2,5, налидиксовая кислота 37±2,8, триметоприм 35±3,4. Высокую устойчивость энтеробактерии проявляли к бензилпенициллину из группы естественных пенициллинов, к стрептомицину, це-фалотину из группы цефалоспоринов I поколения, к полимиксину В, к офлоксацину (таривид) и метрони-дазолу. В ходе выбора селективных компонентов рассматривали антибактериальные препараты, эффективные в отношении сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Бы-ли выбраны из группы гликопептидов ванкомицин, из группы оксазолидинонов линезолид, из группы кетолидов телитромицин. В состав разработанной селективной добавки к среде Drigalski Lactose Agar введены антибиотики ванкомицин и телитромицин в дозе 0,008 г/дм3, линезолид 0,004 г/дм3 среды.
антибиотики, среда, добавка, питательная, селективная
Совершенствование средств оценки показателей микробиоценоза животных, диагностики, профилактики, лечения незаразных и инфекционных болезней является наиболее значимой задачей, стоящей на сегодняшний день перед ветеринарными специалистами, микробиологами и биотехнологами. Одним из важных элементов в лабораторной диагностике инфекционных болезней является выделение возбудителя в чистой культуре на питательных средах [6, 7, 8].
Среды должны иметь рецептуру, оптимально обеспечивающую рост и размножение микроорганизмов определённого вида или семейства. Интенсивное развитие биотехнологии и микробиологии позволяет сегодня разрабатывать новые питательные среды и модифицировать уже имеющиеся рецептуры сред [1, 2, 3, 4, 5].
В связи с этим, конструирование и производство качественных питательных сред, разработка рецептур новых микробиологических сред и совершенствование уже применяемых сред ‒ одно из важных направлений работы в области биотехнологии, медицинской и ветеринарной микробиологии [6, 7, 8, 9].
Цель исследований – совершенствование селективной добавки к элективным средам для выделения энтеробактерий.
Задачи исследований − выявить чувствительность выделенных штаммов энтеробактерий к антибиотикам; разработать новую селективную добавку с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar.
Материал и методы исследования. Объект исследований – новая селективная добавка с антибиотиками к питательной среде Drigalski Lactose Agar. Материал для исследований – 253 изолята бактерий, выделенных из кишечного микробиотопа различных видов животных. Исследования проводили в период с 2010 по 2017 гг.
Суспензию биоматериала для получения роста культур энтеробактерий высевали на дифференциально-диагностические и селективно-элективные питательные среды. Суспензию материала распределяли одноразовым стерильным микробиологическим г-образным шпателем по поверхности среды в чашке Петри и инкубировали в термостате при 25-300С, 370С 48-72 ч [10]. Чистые культуры микроорганизмов идентифицировали по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, серологическим свойствам. Количество выросших колоний микроорганизмов (КОЕ – колониеобразующая единица) на плотных питательных средах проводили общепринятым методом на приборе ПСБ (прибор счёта бактерий).
Определение чувствительности выделенных нами от различных животных изолятов энтерорбактеий к антимикробным препаратам проводили диско-диффузионным методом на среде АГВ и агаре Мюллера-Хинтона. Подбор антибиотиков и создание селективной добавки с антибиотиками к среде Drigalski Lactose Agar осуществляли методом серийных разведений в бульоне МПБ и на Эндо агаре.
Результаты исследований обрабатывали статистически по общепринятой методике с использованием компьютерной программы Microsoft Excel.
Результаты исследований. В процессе разработки новой селективной добавки к питательной среде Drigalski Lactose Agar выявлялась чувствительность энтеробактерий к антимикробным препаратам.
Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к пенициллинам (ампициллин № 1, бензилпенициллин № 2, амоксициллин № 3, карбенициллин № 4 и пиперациллин № 5) и аминогликозидам посредством постановки диско-диффузионного теста представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к пенициллинам
Чистая культура энтеробактерий |
Пенициллины (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
||||
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
№ 4 |
|
Escherichia coli |
16±0,2 |
8±0,1 |
17±0,4 |
22±0,5 |
21±0,6 |
Shigella dysenteriae |
18±0,4 |
3±0,07 |
18±0,6 |
23±0,8 |
22±0,5 |
Shigella flexneri |
19±0,6 |
2±0,05 |
19±0,7 |
25±0,5 |
21±0,9 |
Salmonella Enteritidis |
18±0,4 |
3±0,06 |
17±0,9 |
24±0,7 |
23±0,8 |
Klebsiella oxytoca |
20±1,6 |
3±0,04 |
21±0,8 |
24±0,9 |
25±0,7 |
Proteus vulgaris |
17±1,3 |
0,7±0,08 |
20±1,2 |
26±1,6 |
28±1,4 |
Providencia alcalifaciens |
15±0,4 |
1±0,04 |
18±1,4 |
22±1,8 |
20±1,2 |
Hafnia alvei |
20±1,8 |
0,4±0,3 |
19±1,5 |
25±1,8 |
28±1,7 |
Morganella morganii |
18±2,5 |
0,5±0,06 |
20±1,3 |
23±1,6 |
27±1,5 |
Enterobacter cloacae |
22±1,5 |
0,8±0,2 |
22±1,4 |
28±1,8 |
24±2,3 |
Citrobacter freundii |
22±0,8 |
4±0,1 |
21±1,2 |
25±1,6 |
33±2,2 |
Serratia marcescens |
18±0,4 |
2±0,08 |
17±1,5 |
21±1,4 |
23±1,8 |
Erwinia amylovora |
24±3,8 |
0,4±0,05 |
28±1,7 |
30±2,3 |
37±2,5 |
Kluyvera cryocrescens |
17±1,3 |
0,5±0,07 |
16±1,8 |
21±1,5 |
24±2,0 |
Yersinia enterocolitica |
3±0,4 |
5±0,06 |
15±0,8 |
21±1,2 |
23±1,3 |
Таблица 2
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к аминогликозидам
Чистая культура энтеробактерий |
Аминогликозиды (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
стрептомицин |
канамицин |
амикацин |
гентамицин |
|
Escherichia coli |
16±0,2 |
17±0,1 |
18±0,4 |
15±0,3 |
Shigella dysenteriae |
19±0,7 |
22±0,8 |
24±1,2 |
20±0,6 |
Shigella flexneri |
17±0,9 |
24±1,5 |
20±1,4 |
22±1,3 |
Salmonella Enteritidis |
15±0,5 |
19±0,6 |
22±1,6 |
18±0,2 |
Klebsiella oxytoca |
19±1,7 |
23±1,5 |
18±0,9 |
25±2,3 |
Proteus vulgaris |
17±1,6 |
20±1,3 |
17±1,3 |
23±2,8 |
Providencia alcalifaciens |
18±1,2 |
19±0,8 |
26±1,7 |
21±2,2 |
Hafnia alvei |
18±1,2 |
19±1,7 |
21±1,4 |
22±2,6 |
Morganella morganii |
19±1,8 |
22±2,6 |
19±1,6 |
23±3,2 |
Enterobacter cloacae |
19±1,4 |
22±1,2 |
23±1,7 |
20±1,3 |
Citrobacter freundii |
16±0,8 |
17±0,9 |
20±0,8 |
19±0,5 |
Serratia marcescens |
18±0,3 |
19±0,5 |
17±1,6 |
20±0,8 |
Erwinia amylovora |
22±2,4 |
24±4,2 |
22±1,4 |
19±2,6 |
Kluyvera cryocrescens |
15±1,2 |
19±0,7 |
26±1,8 |
22±1,6 |
Yersinia enterocolitica |
10±0,3 |
23±0,7 |
16±1,2 |
25±0,8 |
Наибольшую антимикробную активность в отношении всех выделенных культур энтеробактерий проявляли карбенициллин из группы карбоксипенициллинов и пиперациллин из группы уреидопенициллинов, канамицин, амикацин и гентамицин. Высокую устойчивость энтеробактерии проявляли к бензилпенициллину из группы естественных пенициллинов и к стрептомицину.
Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к цефалоспоринам (цефалотин № 1, цефтриаксон (лонгацеф) № 2, цефотаксим (клафоран) № 3, цефепим № 4, цефозопран № 5 и цефквин № 6) в результате постановки диско-диффузионного теста представлены в таблице 3. Результаты определения чувствительности энтеробактерий к к тетрациклину представлены в таблице 4.
Таблица 3
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к цефалоспоринам
Чистая культура |
Цефалоспорины (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||||
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
№ 5 |
№ 6 |
|
Escherichia coli |
10±0,5 |
21±1,2 |
23±1,7 |
25±1,9 |
23±1,6 |
22±1,5 |
Shigella dysenteriae |
12±0,8 |
16±1,5 |
18±0,9 |
23±2,2 |
21±1,2 |
20±1,2 |
Shigella flexneri |
10±1,3 |
17±0,9 |
19±1,8 |
24±1,4 |
20±1,3 |
19±0,7 |
Salmonella Enteritidis |
12±0,9 |
18±1,7 |
18±0,6 |
26±1,7 |
18±0,9 |
18±0,5 |
Klebsiella oxytoca |
8±0,5 |
20±1,9 |
17±1,3 |
32±2,3 |
25±1,7 |
23±1,9 |
Proteus vulgaris |
10±1,5 |
17±0,7 |
22±2,5 |
26±1,2 |
22±1,2 |
21±2,3 |
Providencia alcalifaciens |
12±0,7 |
22±1,2 |
21±2,2 |
28±1,9 |
19±0,7 |
20±0,7 |
Hafnia alvei |
10±0,5 |
23±2,3 |
23±1,5 |
30±1,6 |
23±1,4 |
22±1,8 |
Morganella morganii |
11±0,6 |
21±1,8 |
20±0,7 |
34±2,3 |
26±1,7 |
28±2,2 |
Enterobacter cloacae |
10±0,4 |
20±2,4 |
17±0,4 |
33±2,6 |
22±1,2 |
24±1,6 |
Citrobacter freundii |
13±1,7 |
18±0,8 |
16±0,9 |
30±1,8 |
19±1,9 |
25±2,4 |
Serratia marcescens |
12±0,8 |
16±0,5 |
19±1,2 |
38±3,2 |
26±1,3 |
30±3,4 |
Erwinia amylovora |
10±0,5 |
21±0,9 |
21±1,8 |
37±2,8 |
27±1,4 |
31±2,6 |
Kluyvera cryocrescens |
8±0,3 |
20±1,3 |
23±2,5 |
31±2,6 |
22±2,3 |
26±1,8 |
Yersinia enterocolitica |
10±0,7 |
15±0,6 |
20±1,7 |
27±1,8 |
20±1,8 |
22±1,5 |
Таблица 4
Антибиотикочувствительность энтеробактерий
Чистая культура энтеробактерий |
Антибиотики (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
тетрациклин |
доксициклин |
полимиксин В |
хлорамфеникол |
|
Escherichia coli |
17±0,3 |
16±0,8 |
18±1,5 |
18±0,7 |
Shigella dysenteriae |
19±1,2 |
18±0,5 |
10±0,3 |
25±2,3 |
Shigella flexneri |
20±1,6 |
15±0,4 |
12±0,8 |
20±2,6 |
Salmonella Enteritidis |
18±0,9 |
14±0,7 |
10±0,6 |
22±1,8 |
Klebsiella oxytoca |
24±1,8 |
13±0,9 |
19±1,3 |
31±2,5 |
Proteus vulgaris |
27±2,2 |
16±0,5 |
8±0,5 |
26±2,5 |
Providencia alcalifaciens |
22±1,4 |
20±1,2 |
10±1,8 |
20±2,3 |
Hafnia alvei |
20±0,8 |
18±0,7 |
12±1,2 |
23±1,4 |
Morganella morganii |
18±1,5 |
24±1,6 |
8±0,3 |
22±2,4 |
Enterobacter cloacae |
19±0,7 |
26±2,4 |
10±1,6 |
21±1,3 |
Citrobacter freundii |
25±2,3 |
28±2,7 |
18±1,4 |
19±1,5 |
Serratia marcescens |
28±1,6 |
16±1,3 |
12±1,2 |
23±1,6 |
Erwinia amylovora |
22±1,5 |
22±2,6 |
13±0,8 |
26±3,6 |
Kluyvera cryocrescens |
20±1,3 |
18±0,5 |
14±0,9 |
25±1,8 |
Yersinia enterocolitica |
10±0,5 |
34±2,3 |
13±1,5 |
27±2,7 |
Наибольшую антимикробную активность в отношении энтеробактерий проявляли цефепим, тетрациклин, доксициклин и хлорамфеникол. Наибольшая устойчивость энтеробактерии выявлена к цефалотину и к полимиксину В. Результаты определения антибиотикочувствительности энтеробактерий к хинолонам (налидиксовая кислота (невиграмон) № 1, офлоксацин (таривид) № 2 и ципрофлоксацин № 3) представлены в таблице 5. Чувствительность энтеробактерий к метронидазолу
№ 1, фурадонину № 2, ко-тримоксазолу № 3 и триметоприму № 4 приведена в таблице 6.
Наибольшую антимикробную активность в отношении энтеробактерий проявляла налидиксовая кислота и триметоприм. Относительно хорошая устойчивость у большинства энтеробактерии выявлена к офлоксацину (таривид) и метронидазолу.
В ходе выбора селективных компонентов рассматривали антибактериальные препараты, эффективные в отношении сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Были выбраны из группы гликопептидов ванкомицин, из группы оксазолидинонов линезолид, а из группы кетолидов телитромицин.
Таблица 5
Антибиотикочувствительность энтеробактерий к хинолонам
Чистая культура энтеробактерий |
Хинолоны (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
||
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
|
Escherichia coli |
28±2,2 |
15±1,6 |
26±1,8 |
Shigella dysenteriae |
20±1,3 |
16±0,8 |
23±1,5 |
Shigella flexneri |
24±1,8 |
20±1,5 |
23±2,5 |
Salmonella Enteritidis |
27±1,5 |
22±1,8 |
19±1,2 |
Klebsiella oxytoca |
33±2,4 |
18±0,7 |
25±1,6 |
Proteus vulgaris |
22±2,8 |
15±0,5 |
20±1,5 |
Providencia alcalifaciens |
20±1,2 |
20±2,4 |
24±0,8 |
Hafnia alvei |
28±3,4 |
24±3,2 |
20±0,6 |
Morganella morganii |
20±3,8 |
17±0,5 |
29±1,4 |
Enterobacter cloacae |
26±2,6 |
23±2,5 |
19±0,5 |
Citrobacter freundii |
21±1,2 |
28±2,7 |
18±0,7 |
Serratia marcescens |
24±1,7 |
16±2,2 |
22±1,8 |
Erwinia amylovora |
33±3,6 |
19±1,6 |
20±1,3 |
Kluyvera cryocrescens |
23±1,5 |
26±1,8 |
21±0,5 |
Yersinia enterocolitica |
37±2,8 |
20±1,2 |
45±3,6 |
Таблица 6
Антибиотикочувствительность энтеробактерий
Чистая культура энтеробактерий |
Антибиотики (значение зоны ингибиции роста (мм)) |
|||
№ 1 |
№ 2 |
№ 3 |
№ 4 |
|
Escherichia coli |
8±0,8 |
18±1,2 |
17±0,5 |
26±2,3 |
Shigella dysenteriae |
6±0,5 |
22±1,9 |
20±1,2 |
28±2,8 |
Shigella flexneri |
5±0,4 |
26±2,2 |
25±1,5 |
30±2,6 |
Salmonella Enteritidis |
8±1,4 |
15±0,8 |
20±1,6 |
22±1,8 |
Klebsiella oxytoca |
10±1,6 |
8±1,8 |
25±3,2 |
24±1,5 |
Proteus vulgaris |
12±1,8 |
12±1,3 |
25±3,8 |
28±2,5 |
Providencia alcalifaciens |
8±0,8 |
20±1,4 |
25±2,6 |
25±1,8 |
Hafnia alvei |
10±1,2 |
18±2,2 |
23±2,5 |
23±2,0 |
Morganella morganii |
12±1,5 |
10±3,5 |
27±4,5 |
26±1,7 |
Enterobacter cloacae |
10±1,4 |
8±1,4 |
26±1,9 |
27±2,2 |
Citrobacter freundii |
8±0,5 |
20±1,6 |
25±1,5 |
30±2,4 |
Serratia marcescens |
8±1,2 |
19±0,6 |
22±0,7 |
35±3,4 |
Erwinia amylovora |
10±2,2 |
12±1,3 |
37±6,2 |
34±2,6 |
Kluyvera cryocrescens |
12±2,6 |
18±1,2 |
21±0,9 |
32±3,6 |
Yersinia enterocolitica |
10±1,5 |
28±0,6 |
21±0,7 |
30±2,7 |
Ванкомицин является антибиотиком, ингибирующим биосинтез клеточной стенки бактерий, блокируя синтез пептидогликана. Ванкомицин проявляет активность в отношении большинства грамположительных микроорганизмов, особенно в отношении Staphylococcus spp., Streptococcus spp. и Enterococcus spp., в том числе проявляющих устойчивость к антибактериальным препаратам других групп. Устойчивой резистентности к ванкомицину у грамположительных микроорганизмов не выявлено, за исключением единичных клинических случаев. Ванкомицин не имеет перекрёстной резистентности с другими антибиотиками.
Линезолид ингибирует биосинтез микробного белка по принципиально новому механизму действия, чем существенно превосходит по эффективности макролиды, линкозамиды, хлорамфеникол, тетрациклины и аминогликозиды. Линезолид высоко активен в отношении полирезистентных Staphylococcus spp. и Enterococcus spp., а также в отношении Streptococcus pneumonia, Bacillus spp., Corynebacterium spp., Listeria monocytogenes, Mycobacterium tuberculosis и Rhodococcus spp., Clostridium perfringens, C. difficile, Peptostreptococcus spp., Bacteroides fragilis. К линезолиду проявляют чувствительность и грамотрицательные бактерии Haemophilus influenza, Moraxella catarrhalis, Legionella spp., Bordetella pertussis и B. parapertussis. Линезолид обладает достаточно высокой активностью в отношении чувствительных и устойчивых грамположительных бактерий к оксациллину, аминогликозидам, фторхинолонам, макролидам и гликопептидам.
Телитромицин ингибирует биосинтез микробного белка у грамположительных бактерий (прежде всего у Staphylococcus spp. и Streptococcus spp.), проявляет активность в отношении некоторых грамотрицательных бактерий (Neisseria spp., Haemophilus spp., Legionella spp., Helicobacter spp.), а также высокоактивен в отношении Chlamydia spp., Mycoplasma spp. Телитромицин (кетолид) сохраняет активность в отношении всех штаммов бактерий, устойчивых к макролидам и линкосамидам.
В результате минимальная подавляющая концентрация (МПК) ванкомицина и телитромицина для большинства культур энтеробактерий составляла 0,063 г/дм3, а МПК линезолида была на уровне 0,031 г/дм3. Обильный рост культур энтеробактерий наблюдался при концентрации ванкомицина и телитромицина 0,008 г на дм3 среды, а линезолида в концентрации 0,004 на дм3 среды.
В итоге разработанная селективная добавка к питательной среде Drigalski Lactose Agar включает ванкомицин, линезолид и телитромицин (табл. 7). В связи с этим было решено присвоить данной добавке следующее наименование «Селективная добавка ВЛТ».
Таблица 7
Состав селективной добавки ВЛТ
Препараты антибактериальные |
Концентрация, г/дм3 |
Ванкомицин |
0,008 |
Линезолид |
0,004 |
Телитромицин |
0,008 |
Заключение. Наибольшую антимикробную активность в отношении всех выделенных культур энтеробактерий проявляли карбенициллин 30±2,3 из группы карбоксипенициллинов и пиперациллин 37±2,5 из группы уреидопенициллинов, канамицин 24±1,5, амикацин 26±1,7 и гентамицин 25±0,8, цефепим 38±3,2 из группы цефалоспоринов IV поколения, тетрациклин 28±1,6, доксициклин 34±2,3 и хлорамфеникол 31±2,5, налидиксовая кислота 37±2,8, триметоприм 35±3,4. Высокую устойчивость энтеробактерии проявляли к бензилпенициллину из группы естественных пенициллинов, к стрептомицину, цефалотину из группы цефалоспоринов I поколения, к полимиксину В, к офлоксацину (таривид) и метронидазолу. В ходе выбора селективных компонентов рассматривали антибактериальные препараты, эффективные в отношении сопутствующей грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. Были выбраны из группы гликопептидов ванкомицин, из группы оксазолидинонов линезолид, из группы кетолидов телитромицин. В состав разработанной селективной добавки к среде Drigalski Lactose Agar введены антибиотики ванкомицин и телитромицин в дозе 0,008 г/дм3, линезолид в дозе 0,004 г/дм3 среды.
1. Ермаков, В. В. Модификация дифференциально-диагностической среды для выявления и дифферен-циации энтеробактерий / В. В. Ермаков, О. О. Датченко // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра зоотехнии и ветеринарии. - 2018. - Т. 7, № 1. - С. 174-179.
2. Поздеев, О. К. Детекция бета-лактамаз амрсуклинических изолятов энтеробактерий / О. К. Поздеев, Н. Ю. Куряева, А. З. Валиуллина [и др.] // Практическая медицина. - 2018. - № 1 (112).- С. 148-152.
3. Парамонова, Н. Ю. Мониторинг распространения антимикробной резистентности в Костромской обла-сти / Н. Ю. Парамонова, В. В. Кузьмичёв, М. Ю. Якубовская // Инновации в АПК: проблемы и перспективы. - 2017. - № 4 (16).- С. 160-163.
4. Стребкова, В. В. Динамика распространения карбапенемаз грамотрицательных бактерий в отделениях Воронежской городской клинической больницы скорой медицинской помощи № 10 / В. В. Стребкова, О.Н. Затолокина, М.С. Старкова, М.И. Калинина // Многопрофильный стационар. - 2017. - Т.4, №1. - С. 19-21.
5. Тапальский, Д. В. Металло-бета-лактамазы и карбапенемазы экстремально-антибиотикорезистентных энтеробактерий: распространение в Беларуси / Д. В. Тапальский, В. А. Осипова, Е. О. Евсеенко // Здраво-охранение (Минск). - 2017. - № 3. - С. 40-47.
6. Шепелин, А. П. Современное состояние и тенденции в разработке, производстве и применении пита-тельных сред // Бактериология. - 2016. - Т. 1, № 1. - С. 42-47.
7. Шелепин, А. П. Современное состояние и направления развития производства питательных сред в России // Современная лабораторная диагностика. - 2015. - № 2 (16). - С. 18-20.
8. Шилова, А. Н. Характеристика энтеробактерий с множественной резистентностью, колонизирующих кишечный тракт у детей раннего возраста с врождёнными пороками сердца при поступлении в кардиохи-рургический стационар / А. Н. Шилова, В. Н. Ильина, А. И. Субботовская // Клиническая микробиология и ан-тимикробная химиотерапия. - 2016. - Т. 18, № 1. - С. 68-74.
9. Эленшлегер, А. А. Влияние препарата «Ветом 2» на микробный пейзаж кишечника у телят после анти-биотикотерапии / А. А. Эленшлегер, В. А. Афанасьеф // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2017. - № 2 (148). - С. 126-132.
10. Пат. 163081 Российская Федерация, МПК С12М 1/14, А61В 10/02. Одноразовый стерильный микро-биологиче-ский г-образный шпатель / Ермаков В. В. - №2016100537/14 ; заявл.11.01.2016 ; опубл. 10.07.2016 ; Бюл. № 19.