One of the most common endocrine disease in the world and, particularly, in Ukraine is diabetes mellitus. A particular problem in the treatment of this disease is complications. The drug therapy not always provides reduction of the risk of the development of micro and macroangiopathies, this is the major cause of high mortality. The aim of this research was the pharmacological screening the hypoglycémie activity of first synthesized salts of 2-((5-((l,3-dimethyl-2,6-dioxo-2,3-dihydro-lH-purine-7(6H)-yl)methyl)-4-phenyl-4H-l,2,4-triazol-3-yl)thio)-acetate acid. Experimental researches were conducted on white nonlinear rats. The hypoglycémie effect of salts the 2-((5-((l,3-dimethyl-2,6-dioxo-2,3-dihydro-lH-purine-7(6H)-yl)methyl)-4-phenyl-4H-l,2,4-triazol-3-yl)thio)acetate acid was estimated using intraperitoneal test of tolerance to glucose which is reproduced by animals load glucose in the dose of 2 g/kg body weight of rats. The glucose content in a blood was determined by the glucose oxidase method, using a meter «Accu Chek Active». Comparative preparation with a hypoglycémie action is selected a glyburide in a dose 5 mg/kg. It is found, that the compounds, which are studied and a comparative preparation differently changed a glucose level in rats´ blood. Significant hypoglycémie action had the calcium salt of 2-((5-((l,3-dimethyl-2,6-dioxo-2,3-dihydro-lH-purine-7(6H)-yl)methyl)-4-phenyl-4H-l,2,4-triazol-3-yl)thio)acetate acid (GKP-240) acid: (GKP-240) on the 36,22% (p =0.004), 18,72% less active than the referent - glyburide (reduction in the level of glucose in 54,94%, p =6,6·10´5).
derivatives of 1,2,4-triazoles, xanthine, hypoglycémie effect, diabetes
Введение. Одним из наиболее распространенных эндокринных заболеваний в мире и в частности в Украине является сахарный диабет [2]. Определенную проблему в лечении этого заболевания составляют осложнения, и не всегда лекарственная терапия обеспечивает снижение риска развития микро- и макроангиопатии, которые являются основной причиной высокой летальности [1,2,5]. В связи с этим, поиск новых высокоэффективных противодиабетических препаратов, обеспечивающих целевые терапевтические и профилактические эффекты, обладает всеми признаками актуальности. Одним из перспективных научных направлений в этой области является синтез и изучение фармакологических свойств новых органических соединений.
Производные 1,2,4-триазола и ксантина по силе и разнообразию биологической активности занимают одно из ведущих мест среди большого разнообразия гетероциклических соединений [6]. Сочетание фрагментов этих гетероциклических структур должно привести к усилению традиционной фармакологической активности или к появлению нетрадиционных для данных структур фармакологических эффектов.
Цель исследования - фармакологический скрининг гипогликемической активности впервые синтезированных солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты.
Материалы и методы исследования. Гипогликемическое действие солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты оценивали с помощью внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе (ВБТТГ) [3]. ВБТТГ воспроизводили путем нагрузки животных глюкозой в дозе 2 г/кг от массы тела крысы. В опытах использованы белые нелинейные крысы массой 160-230 г, которые были разделены на 13 групп по 7 животных в каждой: 1 - интактная, 2 - контроль, с гликемией (без лечения), 3 - получала глибенкламид в дозе 5 мг/кг [6], 3-13 - получали исследуемые производные 1,2,4-триазола.
Соединения, синтезированные на кафедре токсикологической и неорганической химии Запорожского государственного медицинского университета под руководством профессора Панасенко А.И. и профессора Кныша Е.Г., растворяли в воде очищенной и вводили внутрибрюшинно из расчета 1 мл раствора на 100 г животного. Через 30 минут с момента нагрузки определяли содержание глюкозы в крови, которое определяли глюкозооксидазным методом с использованием глюкометра «Accu Chek Active».
Результаты исследований были обработаны современными статистическими методами анализа на персональном компьютере с использованием, стандартного пакета программ Microsoft Office 2010 (Microsoft Excel) и «STATISTICA® for Windows 6.0». Рассчитывали среднее арифметическое (M) и стандартную ошибку среднего арифметического (±т). Достоверность межгрупповых различий по данным экспериментов устанавливали с помощью t-критерия Стьюдента [4].
Результаты и их обсуждения. В результате проведенного исследования установлено, что соединения, которые изучаются (табл. 1) и препарат сравнения по-разному изменяли уровень глюкозы в крови крыс.
Среди исследуемых веществ уровень глюкозы снижала кальциевая соль 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил) тио)ацетатной кислоты (ГКП-240) на 36,22% (t=4,18, р=0,004), что на 18,72% менее активно, чем референт-препарат глибенкламид (снижение уровня глюкозы на 54,94%, t=8,41, ρ=6,6χ10-5).
Остальные исследуемые соли 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты при введении животным с гликемией, вызванной глюкозной нагрузкой, приводили к значительной гликемии по сравнению с контрольной группой.
Так, наиболее активно уровень глюкозы в крови опытных крыс повышали соединения ГКП-239, ГКП-238, ГКП-233 (магниевая, цинковая и пиперидиниевая соли 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты).
Соединения ГКП-239, ГКП-238 и ГКП-233 увеличивали уровень глюкозы на 106,01% (t=27,12, ρ=2,38×10-8), 179,87% (t=22,04, p=1×10-7) и 179,43% (t=19,86, ρ=2,05×10-7) соответственно.
Исходная кислота и диэтиламмониевая соль 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты (ГКП-244 и ГКП-243) повышали содержание глюкозы на
1. Stárkova NT. Klinicheskaya endokrinologiya. Ruko-vodstvo. 3-е izd., pererabotannoe i dopolnennoe. Sankt-Peterburg: Piter; 2002. Russian.
2. Kuzishin OV, Kovalishin NV, Almashina KhV. Biokhimiya tsukrovogo diabetů: 1. Teoretichna chastina (og-lyad). Visnik Prikarpats´kogo natsional´nogo universitetu. Seriya khimiya. 2009;9:74-116. Russian.
3. Stefanova AV. Metodichni vkazivki po doklinichnomu vivchennyu likars´kikh zasobiv. Kiev; 2001. Russian.
4. Rebrova OYu. Statisticheskiy analiz meditsinskikh dan-nykh. Primenenie paketa prikladnykh programm STATISTICA. Moscow: MediaSfera; 2002. Russian.
5. Sergienko VO. Dislipoprote´inemi´i pri tsukrovomu diabeti 2 tipu: osnovni napryamki likuvannya. Zhurnal NAMN Ukraïni. 2012;18(2):205-16. Russian.
6. Raafat M Shaker. The chemistry of mercapto- and thion-substituted 1,2,4-triazoles and their utility in heterocyclic synthesis. ARKIVOC. 2006;9:59-112.
