Одним из наиболее распространенных эндокринных заболеваний в мире и в частности в Украине является сахарный диабет. Определенную проблему в лечении этого заболевания составляют осложнения, и не всегда лекарственная терапия обеспечивает снижение риска развития микро- и макроангиопатии, что служит основной причиной высокой летальности. Целью нашего исследования был фармакологический скрининг гипогликемической активности впервые синтезированных солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты. Экспериментальные исследования проведены на белых нелинейных крысах. Гипогликемическое действие солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты оценивали с помощью внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе который воспроизводили путем нагрузки животных глюкозой в дозе 2 г/кг от массы тела крысы. Содержание глюкозы в крови определяли глюкозооксидазным методом с использованием глюкометра «Accu Chek Active». Препарат сравнения с гипогликемическим действием избран глибенкламид в дозе 5 мг / кг. Установлено что соединения, которые изучаются и препарат сравнения по-разному изменяли уровень глюкозы в крови крыс. Значительным гипогликемическим действием обладала кальциевая соль 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты (ГКП-240) на 36,22% (р =0,004), что на 18,72% менее активно, чем референт- глибенкламид (снижение уровня глюкозы на 54,94%, р =6,6·10"5).
производные 1,2,4-триазола, ксантин, гипогликемическое действие, диабет
Введение. Одним из наиболее распространенных эндокринных заболеваний в мире и в частности в Украине является сахарный диабет [2]. Определенную проблему в лечении этого заболевания составляют осложнения, и не всегда лекарственная терапия обеспечивает снижение риска развития микро- и макроангиопатии, которые являются основной причиной высокой летальности [1,2,5]. В связи с этим, поиск новых высокоэффективных противодиабетических препаратов, обеспечивающих целевые терапевтические и профилактические эффекты, обладает всеми признаками актуальности. Одним из перспективных научных направлений в этой области является синтез и изучение фармакологических свойств новых органических соединений.
Производные 1,2,4-триазола и ксантина по силе и разнообразию биологической активности занимают одно из ведущих мест среди большого разнообразия гетероциклических соединений [6]. Сочетание фрагментов этих гетероциклических структур должно привести к усилению традиционной фармакологической активности или к появлению нетрадиционных для данных структур фармакологических эффектов.
Цель исследования - фармакологический скрининг гипогликемической активности впервые синтезированных солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты.
Материалы и методы исследования. Гипогликемическое действие солей 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты оценивали с помощью внутрибрюшинного теста толерантности к глюкозе (ВБТТГ) [3]. ВБТТГ воспроизводили путем нагрузки животных глюкозой в дозе 2 г/кг от массы тела крысы. В опытах использованы белые нелинейные крысы массой 160-230 г, которые были разделены на 13 групп по 7 животных в каждой: 1 - интактная, 2 - контроль, с гликемией (без лечения), 3 - получала глибенкламид в дозе 5 мг/кг [6], 3-13 - получали исследуемые производные 1,2,4-триазола.
Соединения, синтезированные на кафедре токсикологической и неорганической химии Запорожского государственного медицинского университета под руководством профессора Панасенко А.И. и профессора Кныша Е.Г., растворяли в воде очищенной и вводили внутрибрюшинно из расчета 1 мл раствора на 100 г животного. Через 30 минут с момента нагрузки определяли содержание глюкозы в крови, которое определяли глюкозооксидазным методом с использованием глюкометра «Accu Chek Active».
Результаты исследований были обработаны современными статистическими методами анализа на персональном компьютере с использованием, стандартного пакета программ Microsoft Office 2010 (Microsoft Excel) и «STATISTICA® for Windows 6.0». Рассчитывали среднее арифметическое (M) и стандартную ошибку среднего арифметического (±т). Достоверность межгрупповых различий по данным экспериментов устанавливали с помощью t-критерия Стьюдента [4].
Результаты и их обсуждения. В результате проведенного исследования установлено, что соединения, которые изучаются (табл. 1) и препарат сравнения по-разному изменяли уровень глюкозы в крови крыс.
Среди исследуемых веществ уровень глюкозы снижала кальциевая соль 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил) тио)ацетатной кислоты (ГКП-240) на 36,22% (t=4,18, р=0,004), что на 18,72% менее активно, чем референт-препарат глибенкламид (снижение уровня глюкозы на 54,94%, t=8,41, ρ=6,6χ10-5).
Остальные исследуемые соли 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты при введении животным с гликемией, вызванной глюкозной нагрузкой, приводили к значительной гликемии по сравнению с контрольной группой.
Так, наиболее активно уровень глюкозы в крови опытных крыс повышали соединения ГКП-239, ГКП-238, ГКП-233 (магниевая, цинковая и пиперидиниевая соли 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты).
Соединения ГКП-239, ГКП-238 и ГКП-233 увеличивали уровень глюкозы на 106,01% (t=27,12, ρ=2,38×10-8), 179,87% (t=22,04, p=1×10-7) и 179,43% (t=19,86, ρ=2,05×10-7) соответственно.
Исходная кислота и диэтиламмониевая соль 2-((5-((1,3-диметил-2,6-диоксо-2,3-дигидро-1Н-пурин-7(6Н)-ил)метил)-4-фенил-4Н-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетатной кислоты (ГКП-244 и ГКП-243) повышали содержание глюкозы на
1. Старкова, H.Т. Клиническая эндокринология. Руководство / Н.Т. Старкова. - 3-е изд., переработанное и дополненное.- Санкт-Петербург: Питер, 2002- 576 с.
2. Кузишин, О.В. Біохімія цукрового діабету: 1. Теоретична частина (огляд) / О.В. Кузишин, Н.В. Ковалишин, Х.В. Алмашина // Вісник Прикарпатського національного університету. Серія хімія.-Вип. 9.-С. 74-116.
3. Методичні вказівки по доклінічному вивченню лікарських засобів: Під ред. A.B. Стефанова-К., 2001-567 с
4. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва.- М.: МедиаСфера, 2002.- 312 с.
5. Сергієнко В.О. Дисліпопротеїнемії при цукровому діабеті 2 типу: основні напрямки лікування / В.О. Сергієнко // Журнал НАМИ України.- 2012.- Т. 18.- № 2.- С. 205-216.
6. Raafat, M. Shaker. The chemistry of mercapto- and thion-substituted 1,2,4-triazoles and their utility in heterocyclic synthesis / Raafat M. Shaker // ARKIVOC- 2006.- Vol. IX.-P. 59-112.
