Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
The contents of total cholesterol, high-density lipoproteins, low-density lipoproteins, and triglycerides in cord blood were studied at moderate cerebral ischemia in 230 mature newborns from mothers with chronic cytomegalovirus infection (CMVI) in the second trimester of gestation (main group). The first group (control group) consisted of 30 newborns from mothers with physiological pregnancy. Depending on the activity of chronic CMVI, 4 groups were distinguished, in each of which there were 2 subgroups. Subgroup A included newborns from mothers with pregnancy and an uncomplicated threat of miscarriage, and in subgroup B there were the patients whose mothers suffered the threat of miscarriage at 16-21st week of gestation. The second group was represented by 50 newborns whose mothers had a latent course of chronic CMVI. The third group included 50 children from mothers with reactivation of chronic CMVI (titers of IgM antibodies to CMV were 1:200-1:400, IgG antibody titers to CMVI were 1:200-1:400, avidity index of IgG antibodies to CMVI was more than 65%). The fourth group included 50 newborns whose mothers suffered an acute phase of chronic CMVI (titers of IgM antibodies to CMV were 1:200-1:400, IgG antibody titers to CMV were 1:200-1: 800, avidity index of IgG antibodies to CMV was more than 65%), and in the fifth group there were 50 patients with antenatal history with reactivation of chronic CMVI (IgM antibody titers to CMV were 1:200-1:400, IgG antibody titers to CMV were 1:400-1:1600, avidity index of IgG antibodies to CMV was more than 65%). When comparing 2A and 2B subgroups with the first group, there were no significant changes in total cholesterol of high and low density lipoproteins and triglycerides. In children in 3A subgroup, the concentration of low density lipoproteins decreased to 0.34±0.02 mmol/L, and in 3B subgroup to 0.32±0.02 mmol/L with simultaneous increase in the triglyceride level to 0.51±0.03 mmol/L (in the first group, it was 0.53±0.03 mmol/L, p<0.001 and 0.43±0.03 mmol/L, p<0.05, respectively). In comparison with the first group in 5B subgroup, the lowest total cholesterol values (1.82±0.05 mmol/L, p<0,05), low-density lipoproteins (0.21±0.05 mmol/L, p<0.001), as well as high triglycerides (0.59±0.03, p<0.001) were registered. These can weaken the compensatory-adaptive reactions of the hormonal system that regulates the immune response, vascular permeability and the blood-brain barrier, as well as disrupt the blood supply to the brain in newborns with moderate cerebral ischemia.
lipids, liver, moderate cerebral ischemia, mature newborns, cytomegalovirus infection
Осложненное течение беременности у матерей часто сопровождается изменением липидного обмена у их потомства [2]. Герпесвирусная инфекция с высоким титром противовирусных антител у женщин в период гестации играет важную роль в нарушении синтеза липидов в печени у их новорожденных [5]. Однако до настоящего времени не установлен характер изменений липидного спектра пуповинной крови у детей от матерей с латентным течением и реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) во втором триместре беременности, неосложненной и осложненной угрозой невынашивания.
Цель работы – изучить липидсинтезирующую функцию печени при церебральной ишемии средней степени тяжести у новорожденных от матерей с ЦМВИ.
Материалы и методы исследования
Проводилось изучение общего холестерина (ОХС), липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), липопротеидов низкой плотности (ЛПНП), триглицеридов (ТГ) у 230 новорожденных от матерей с физиологическим течением беременности, а также с латентным течением хронической ЦМВИ и с реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре гестации. Все дети были разделены на 5 групп.
Первая группа (контрольная) была представлена 30 здоровыми доношенными новорожденными от женщин с неосложненным течением беременности. У их матерей во втором триместре гестации в парных сыворотках крови не определялись титры антител IgG и IgM к цитомегаловирусу (ЦМВ). В то же время обнаруживались титры антител IgG к вирусу простого герпеса первого типа (ВПГ-1) 1:200-1:400 при отсутствии роста в динамике титров антител IgG к ВПГ-1 и индексе авидности антител IgG к ВПГ-1 более 65%.
Во второй, третьей, четвертой и пятой группах больных с хронической ЦМВИ выделялись 2 подгруппы: доношенные новорожденные подгруппы А не имели в анамнезе угрозы невынашивания у их матерей в период беременности; у доношенных подгруппы Б антенатальный анамнез был отягощен угрозой невынашивания у их матерей во втором триместре.
Во вторую группу (основную) вошли 50 новорожденных, матери которых страдали латентной хронической ЦМВИ (титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%), ассоциированной с латентным течением герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%) во втором триместре беременности. В подгруппу 2А вошли 25 новорожденных и в подгруппу 2Б – 25 пациентов.
Третья группа состояла из 50 детей от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400 без четырехкратного роста титров антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400 и с индексом авидности антител IgG к ЦМВ более 65%) на фоне латентной герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400 и индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). Подгруппа 3А включала 25 детей, и 3Б – 25 пациентов.
Четвертая группа была сформирована 50 новорожденными, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ (титры антител IgM к ЦМВ 1:200-1:400, антитела IgG к ЦМВ 1:200-1:800 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65% на фоне латентной герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). В подгруппах 4А и 4Б находилось по 25 детей.
Пятую группу составили 50 новорожденных от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ (титры антител IgМ к ЦМВ 1:200-1:400, четырехкратный рост титров антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600 и индекс авидности IgG к ЦМВ более 65%) на фоне латентного течения герпесвирусной инфекции (титры антител IgG к ВПГ-1 1:200-1:400, индекс авидности IgG к ВПГ более 65%). В подгруппы 5А и 5Б вошли по 25 детей перинатального возраста.
Критериями включения пациентов в основную группу были: 1) церебральная ишемия средней степени тяжести у доношенных детей от матерей с одноплодной беременностью; 2) новорожденные от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре гестации, неосложненной и осложненной угрозой невынашивания; 3) отсутствие в антенатальном анамнезе у детей липидемии, ожирения 1-3 степени, нейроэндокринно-обменного синдрома, сахарного диабета, заболеваний щитовидной, поджелудочной железы и надпочечников, среднетяжелой и тяжелой патологии дыхательной, сердечно-сосудистой, мочевыделительной систем в стадии ремиссии или обострения, а также среднетяжелой и тяжелой акушерской патологии у их матерей во втором триместре беременности; 3) новорожденные с внутриутробным развитием, неосложненным другими ТОRCH-инфекциями у их матерей во втором триместре беременности.
Критерии исключения: 1) церебральная ишемия легкой и тяжелой степени у детей от матерей с одноплодной и многоплодной беременностью, а также с острыми и обострением хронических заболеваний, обусловленных другими инфекциями; 2) новорожденные, матери которых страдали среднетяжелой, тяжелой соматической и акушерской патологией в период беременности; 3) дети от матерей с истмико-цервикальной недостаточностью и аномалиями развития матки; 4) крупные новорожденные и дети, рожденные от матерей с помощью операции кесарева сечения; 4) новорожденные от матерей, которые отказались участвовать в настоящем исследовании.
Диагностика формы ЦМВИ у матерей во втором триместре беременности осуществлялась в парных сыворотках крови (при первом обследовании и через 12-14 дней) с помощью наборов реагентов ЗАО «Вектор-Бест», а индекса авидности антител IgG к ЦМВ и IgG к ВПГ-1 – «ВекторЦМВ − IgG – авидность» и «Вектор ВПГ− IgG – авидность» (Россия).
В сыворотке пуповинной крови у детей определялось содержание (ммоль/л) ОХС, ЛПВП, ЛПНП и ТГ с помощью стандартных наборов реагентов на анализаторе фирмы «Beckman Coulter, Inc» (США).
В работе учитывались требования Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта» с поправками 2013 г. и нормативных документов «Правила надлежащей клинической практики в Российской Федерации», утвержденных Приказом №200н от 01.04.2016 МЗ РФ. Работа одобрена Комитетом по биомедицинской этике ДНЦ ФПД в соответствии с принципами конвенции о биомедицине и правах человека, а также общепризнанными нормами международного права, от всех здоровых и больных лиц было получено информированное согласие.
Статистическая обработка и анализ данных осуществлялась с использованием стандартного пакета прикладных программ Statistica 6.1. Анализируемые в работе количественные данные имели нормальное распределение, поэтому рассчитывалась достоверность различий значений по Стьюденту − вычисление средней арифметической (М), средней ошибки (m). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы (p) принимался равным 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
При оценке липидного спектра сыворотки пуповинной крови у новорожденных первой группы в сравнении с таковым в 2А и 2Б подгруппах не обнаруживались достоверные различия концентрации ОХС, ЛПНП и ТГ. Это указывало на отсутствие негативного влияния латентного течения хронической ЦМВИ у их матерей на формирование ферментных систем фетальной печени во втором триместре гестации (табл. 1, 2). В 3А и 3Б подгруппах по сравнению с контролем определялись более низкие показатели ЛПНП, что позволяло утверждать об изменении их соотношения с ЛПВП, уровень которых обеспечивал защиту эндотелиальной выстилки кровеносного русла [11], в том числе и у детей от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ. Одновременно в 3Б подгруппе возрастало содержание ТГ. У доношенных новорожденных в сыворотке пуповинной крови уровень ТГ обычно составлял 0,3 до 0,5 ммоль/л [10] и увеличение их концентрации следует рассматривать как одну из компенсаторно-приспособительных реакций. При этом достоверно не изменялась концентрация ОХС. У пациентов 5А подгруппы в сопоставлении с показателями у детей 2А, 3А, 4А подгрупп диагностировалась прогрессирующее снижение ЛПНП. В то же время в 5А подгруппе показатели ЛПНП были более низкими, чем во 2А подгруппе.
Cопоставление уровня липидов при церебральной ишемии у пациентов 4А и 4Б подгрупп с первой группой также показало снижение уровня ЛПНП и рост ТГ. В то же время в 4Б подгруппе регистрировались более низкие показатели ОХС, регулирующего жесткость клеточных мембран, изменяющего их свойства, а также участвующего в стероидогенезе [6].
По отношению к контролю наблюдалось падение уровня ОХС в 5Б подгруппе. У обследованных пациентов 5Б подгруппы в сопоставлении с первой группой и 2Б, 3Б подгруппами, при рождении выявлялось снижение ЛПНП, а увеличение ТГ регистрировалось только в 2Б подгруппе (табл. 2). Возможно, что изменение концентрации этих липидов обусловлено выраженным антенатальным влиянием возбудителя и продуктов его метаболизма на состояние липидсинтезирующей функции печени у плода.
Возможно, что высокие значения ТГ связаны со стимуляцией триглицеридлипазы, активность которой регулируется соматотропным гормоном, глюкагоном и адреналином [9]. Если увеличение ОХС в мембранах у детей приводило к повышению микровязкости и жесткости, к падению деформируемости их эритроцитов и к нарушению реологических свойств крови [8], то выявленное нами снижение ОХС в крови из вены пуповины при церебральной ишемии средней степени тяжести у детей от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре беременности, осложненной угрозой невынашивания, можно рассматривать как одну из компенсаторно-приспособительных реакций гепатобилиарной системы на антенатальную токсико-вирусологическую агрессию.
Таблица 1
Изменение содержания ОХС, ЛПВП, ЛПНП и ТГ у доношенных новорожденных от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре беременности (М±m)
|
Исследуемые группы |
Биохимические показатели, ммоль/л |
|||
|
ОХС |
ЛПВП |
ЛПНП |
ТГ |
|
|
Первая группа |
2,03±0,06 |
1,29±0,05 |
0,53±0,03 |
0,43±0,03 |
|
2А подгруппа |
1,97±0,06 р1>0,05 |
1,29±0,07 р1>0,05 |
0,47±0,03 р1>0,05 |
0,45±0,02 р1>0,05 |
|
3А подгруппа |
1,93±0,06 р1>0,05; р2>0,05 |
1,34±0,08 р1>0,05; р2>0,05 |
0,34±0,02 р1<0,001; р2<0,01 |
0,49±0,03 р1>0,05; р2>0,05 |
|
4А подгруппа |
1,89±0,05 р1>0,05; р2>0,05 р3>0,05 |
1,36±0,05 р1>0,05; р2>0,05 р3>0,05 |
0,31±0,02 р1<0,001; р2<0,001 р3>0,05 |
0,53±0,03 р1<0,05; р2>0,05 р3>0,05 |
|
5А подгруппа |
1,84±0,05 р1>0,05; р2>0,05 р3>0,05; р4>0,05 |
1,38±0,05 р1>0,05; р2>0,05 р3>0,05; р4>0,05 |
0,24±0,02 р1<0,001; р2<0,001 р3<0,001; р4<0,05 |
0,56±0,03 р1<0,01; р2<0,05 р3>0,05; р4>0,05 |
Примечание: р1 – уровень значимости различий по сравнению с показателями первой группы; р2 – то же с показателями 2А подгруппы; р3 – то же с показателями 3А подгруппы; р4 – то же с показателями 4А подгруппы.
Показано, что у новорожденных с перинатальной гипоксией, приводящей к более тяжелой церебральной ишемии, также диагностируются более низкие значения ОХС [6], концентрация которого находится в обратно пропорциональной зависимости от уровня кортизола у детей с синдромом увеличенной вилочковой железы [1].
Таблица 2
Изменение содержания ОХС, ЛПВП, ЛПНП и ТГ у доношенных новорожденных от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ во втором триместре гестации, осложненной угрозой невынашивания беременности (М±m)
|
Исследуемые группы |
Биохимические показатели, ммоль/л |
|||
|
ОХС |
ЛПВП |
ЛПНП |
ТГ |
|
|
Первая группа |
2,03±0,06 |
1,29±0,05 |
0,53±0,03 |
0,43±0,03 |
|
2Б подгруппа |
1,94±0,05 р1>0,05 |
1,31±0,07 р1>0,05 |
0,44±0,03 р1>0,05 |
0,47±0,03 р1>0,05 |
|
3Б подгруппа |
1,90±0,06 р1>0,05; р2>0,05 |
1,35±0,07 р1>0,05; р2>0,05 |
0,32±0,02 р1<0,001; р2<0,01 |
0,51±0,03 р1<0,05; р2>0,05 |
|
4Б подгруппа |
1,85±0,05 р1<0,05; р2>0,05 р3>0,05 |
1,39±0,05 р1>0,05; р2>0,05 р3>0,05 |
0,26±0,03 р1<0,001; р2<0,001 р3>0,05 |
0,55±0,03 р1<0,01; р2<0,05 р3>0,05 |
|
5Б подгруппа |
1,82±0,05 р1<0,05; р2>0,05 р3>0,05; р4>0,05 |
1,46±0,06 р1<0,05; р2>0,05 р3>0,05; р4>0,05 |
0,21±0,02 р1<0,001; р2<0,001 р3<0,001; р4>0,05 |
0,59±0,03 р1<0,001; р2<0,01 р3>0,05; р4>0,05 |
Примечание: р1 – уровень значимости различий по сравнению с показателями первой группы; р2 – то же с показателями 2Б подгруппы; р3 – то же с показателями 3Б подгруппы; р4 – то же с показателями 4Б подгруппы.
Обращали на себя внимание более высокие показатели ЛПВН у доношенных новорожденных 5Б подгруппы в сравнении с первой группой. Известно, что ЛПВП обеспечивают защиту эндотелиальной выстилки кровеносных сосудов [4], а также транспорт холестерина от периферических тканей к печени, где осуществляется основной рецепторопосредованный катаболизм около половины частиц ЛПНП [11].
Таким образом, при церебральной ишемии средней степени тяжести у доношенных новорожденных от матерей с латентным течением и реактивацией хронической ЦМВИ без роста титров антител IgG к ЦМВ и с увеличением титров антител IgG к ЦМВ в 4 раза во втором триместре беременности, осложненной угрозой невынашивания при своевременных родах, отмечаются более выраженные нарушения липидного спектра пуповинной крови. В патогенезе ранней неонатальной дислипидемии важная роль отводится сочетанному влиянию ЦМВ, продуктов деструкции клеток и тканей, а также кортизола, синтез которого индуцируется вирусной инфекцией [7] на липидсинтезирующую функцию печени. Вышеизложенное подтверждают и экспериментальные исследования, показавшие доминирующую роль эндотоксемии в поражении ключевого органа детоксикации, посредством повышения активности перекисного окисления мембран липидов и фосфолипазы А2 [3].
Выводы
- При церебральной ишемии средней степени тяжести у доношенных новорожденных с антенатальным анамнезом, отягощенным латентной хронической ЦМВИ у их матерей во втором триместре беременности, неосложненной и осложненной угрозой невынашивания, по сравнению со здоровыми детьми не наблюдается значительных изменений концентрации ОХС, ЛПВП, ЛПНП и ТГ. Данные биохимические показатели подтверждают менее значимую роль этой формы вирусной инфекции у матерей в период гестации в изменении липидного спектра пуповинной крови у их потомства.
- У доношенных детей с церебральной ишемией средней степени тяжести от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ (антитела IgM к ЦМВ 1:200-1:400, без четырехкратного роста титров антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400) во втором триместре гестации, осложненной угрозой невынашивания, в сопоставлении с контролем наблюдается снижение содержания ЛПНП и увеличение концентрации ТГ. Изменение уровня липидов сыворотки пуповинной крови может быть связано с негативным влиянием на липидсинтезирующую функцию печени плода материнских возбудителей инфекции и их токсинов в период его внутриутробной жизни.
- Церебральная ишемия средней степени тяжести у новорожденных, матери которых перенесли реактивацию хронической ЦМВИ (антитела IgM к ЦМВ 1:200-1:400, рост титров антител IgG к ЦМВ 1:200-1:800) во втором триместре гестации, осложненной угрозой невынашивания, характеризуется снижением синтеза в печени ОХС, ЛПНП на фоне увеличения ТГ. Развитие дислипидемии может нарушать синтез стероидных гормонов, участвующих в регуляции иммунных процессов, системного артериального давления и мозгового кровотока.
Патология центральной нервной системы у доношенных от матерей с реактивацией хронической ЦМВИ (антитела IgM к ЦМВ 1:200-1:400, рост титров антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600) во втором триместре беременности, осложненной угрозой невынашивания, по сравнению со здоровыми детьми сопровождается максимально низкими величинами ОХС и ЛПНП, а также ростом концентрации ЛПВП и ТГ. С одной стороны, это повышает устойчивость эндотелиальной выстилки кровеносных сосудов к токсикозу и к вирусной агрессии, а с другой – индуцирует развитие дисгормональных процессов, изменяющих системное артериальное давление, проницаемость магистральных сосудов и гематоэнцефалического барьера, что приводит к цереброваскулярной недостаточности.
1. Vaganov P.D., Arion V.Ya., Polishuk A.V., Reshetnikova L.P., Marchenko L.F., Turkina T.I., Sysoeva O.B. Serum and cell membranes lipids in children with thymomegalia syndrome. Pediatriya 2004; 83(2):91-95 (in Russian).
2. Vakhitova L.F. The state of the parameters of membranolysis and lipid metabolism in newborns who have undergone perinatal hypoxia, and methods of correction: abstract of PhD thesis. Kazan'; 2004 (in Russian).
3. Vlasov A.P., Kamkina O.V., Trofimov V.A., Vlasova V.I., Abramova S.V., Bolotskikh V.A. Metabolic changes in the liver with endogenous intoxication. Bulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny 2017; 163(3):294-297 (in Russian).
4. Israfilova N.M., Yusubova A.M. Modern ideas about the pathogenesis of diabetic angiopathies. Voprosy okhrany materinstva i detstva 1989; 34(9):52-55 (in Russian).
5. Ishutina N.A. Lipid structure of umbilical blood of newborn from mothers with pathological pregnancy. Bûlleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2008; 30:56-58 (in Russian).
6. Ledyaykina L.V., Vlasov A.P., Gerasimenko A.V. Lipid spectrum of blood in cerebral ischemia in children of early neonatal age. Pediatriya 2012; 91(1):17-20 (in Russian)
7. Lutsenko M.T. Dynamics of cortisol activity in peripheral blood of pregnant women who suffered herpes-virus infection. Bûlleten' fiziologii i patologii dyhaniâ 2010; 38:51-54 (in Russian).
8. Mazurin A.V., Plakhuta T.G., Spiridonova V.N., Tsymbal I.N., Galaeva S.S. Features of lipid and phospholipid composition of blood plasma and erythrocyte membranes in hemorrhagic vasculitis in children. Gematologiya i transfuziologiya 1994; 39(2):37-39 (in Russian).
9. Pal'chik A.B., Shabalov N.P. Hypoxic-ischemic encephalopathy of newborns. St. Petersburg: Sotis; 2007 (in Russian).
10. Sushko E.P., Novikova V.I., Tupkova L.M. Neonatology. Moscow; 1998 (in Russian).
11. Tvorogova M.G. Lipids and lipoproteins, laboratory diagnostics of lipid transport system disorders (review). Klinicheskayai laboratornaya diagnostika 2008; 10:21-32 (in Russian).
