Цель исследования – изучить изменения гематологических показателей у спонтанно зараженных бычков при моно- и микстинвазии трематодами. Материалы и методы. Исследовали кровь зараженных гельминтами и интактных бычков в возрасте 12–16 мес. Бычков по результатам копрологических исследований по принципу аналогов разделили на 4 группы по 5 голов в каждой. Животные первой группы были спонтанно инвазированы фасциолами, второй – дикроцелиями, третьей – ассоциацией фасциол с дикроцелиями. Бычки четвертой группы служили интактным контролем. В последующем животные были подвергнуты убою, что позволило методом гельминтологического вскрытия (по К.И.Скрябину) подтвердить диагнозы. Результаты и обсуждение. Установлены изменения гематологических показателей бычков при моно- и микстинвазии трематодами. При этом достоверно отмечается уменьшение числа эритроцитов в крови на 1,4±0,31–2,77±0,2 × 1012/л, в том числе при заражении фасциолами на 23,61 %, дикроцелиями – на 18,06, а при их ассоциации – на 35,74 %. Концентрация гемоглобина значительно ниже физиологической нормы и по сравнению с показателями крови контрольных интактных животных уменьшается в 1,44–1,6 раза. В лейкограмме наблюдаются изменения, характерные для регенеративного сдвига ядра, что является показателем активации деятельности костного мозга и наличия воспалительных процессов. Это подтверждается расчетом индекса ядерного сдвига, который при заражении печеночным сосальщиком равен 0,24, что соответствует легкой степени поражения, а при наличии трематод Dicrocoelium lanceatum и ассоциации c Fasciola hepatica достигает 0,37–0,48 и служит показателем средней степени тяжести патогенного воздействия трематод.
трематоды, ассоциация, эритроциты, гемоглобин, индекс сдвига ядра
Патогенетическое воздействие паразитов общеизвестно и, в первую очередь, отражается на показателях крови, которые меняются в зависимости от вида возбудителя, интенсивности инвазии, общей резистентности организма, условий кормления и содержания и т. д. [2].
Данные об изменениях гематологических показателей при трематодозах при средней степени инвазии противоречивы [1, 3, 5–7]. Так, по данным Абдуллаева [1] при остром фасциолезе у животных отмечают уменьшение числа эритроцитов и концентрации гемоглобина соответственно на 16–20 и 18,4–35 %, а также увеличение числа лейкоцитов в 2,1–2,2 раза по сравнению с показателями контрольных животных. При этом в лейкоцитарной формуле при наличии у бычков фасциол процент базофилов увеличивается в 1,9–1,5 раза, палочкоядерных нейтрофилов – в 1,9–4,2 раза, лимфоцитов – на 6–9 %, но уменьшается число сегментоядерных нейтрофилов в 1,6–2,35 раза и моноцитов – на 25–30 % по сравнению с показателями агельминтных животных. При хроническом фасциолезе гематологические показатели постепенно ухудшаются с одновременным существенным снижением числа лейкоцитов у больных животных.
Мазихова с соавт. [5] подтверждают эти данные и отмечают при средней степени инвазии в острый период заболевания фасциолезом базофилию, увеличение палочкоядерных нейтрофилов и лимфоцитов, но уменьшение сегментоядерных нейтрофилов и моноцитов (на 26–31 %). При дикроцелиозе, по данным этих авторов, наиболее выражены изменения в острый период. С переходом болезни в хроническую форму гематологические показатели постепенно улучшаются.
Некоторые авторы [3] регистрируют пик гематологических изменений на 30-е сутки заражения трематодами. При этом обнаружено снижение гемоглобина на 26,8 %, эритроцитов – на 11,1, лимфоцитов – на 15,6 % с одновременным увеличением более чем в два раза содержания лейкоцитов по сравнению с показателями животных контрольной группы.
При фасциолезной инвазии наблюдают уменьшение числа эритроцитов до 3,9–4,8 × 1012/л, гемоглобина – на 30,7 %, лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов – в 1,4 раза, повышение числа лейкоцитов в 2 раза, палочкоядерных нейтрофилов в 1,6, базофилов – в 1,8, моноцитов – в 3, эозинофилов в 3,9 раза [7].
Однако, основные исследования указанными авторами проводились при остром процессе и чаще при моноинвазиях. При этом опытов, направленных на определение морфологической картины крови у спонтанно зараженных животных при различных ассоциациях гельминтозов, недостаточно.
Исходя из вышесказанного, мы задались целью изучить изменения гематологических показателей у спонтанно зараженных бычков при моно- и микстинвазии трематодами.
Материалы и методы
Материалом для исследований служила кровь зараженных гельминтами и интактных бычков в возрасте 12–16 мес, которых по результатам копрологических исследований по принципу аналогов разделили на 4 группы по 5 голов в каждой. Животные первой группы были спонтанно инвазированы фасциолами, второй – дикроцелиями, третьей – ассоциацией фасциол с дикроцелиями, а четвертой – являлись контролем (интактные). В последующем животные были подвергнуты убою, что позволило методом гельминтологического вскрытия (по Скрябину) подтвердить диагнозы.
Результаты и обсуждение
Результаты наших исследований показали, что у спонтанно инвазированных животных, несмотря на отсутствие клинических признаков, наблюдаются изменения гематологических показателей (табл.).
При изучении морфологического состава крови бычков опытных групп мы выявили достоверное уменьшение числа эритроцитов в крови у животных по сравнению с контрольной группой на 1,4±0,31–2,77±0,2 × 1012/л, в том числе при заражении фасциолами – на 23,61 %, дикроцелиями – на 18,06, а при их ассоциации – на 35,74 %.
Концентрация гемоглобина была значительно ниже физиологической нормы и по сравнению с показателями крови контрольных интактных животных (Р < 0,001) уменьшалась в 1,44–1,6 раза.
Общее число лейкоцитов у животных всех опытных групп было в пределах физиологической нормы и колебалось от 5,45±0,68 × 109/л до 8,07±0,44 × 109/л. Однако при моноинвазии фасциолами и дикроцелиями у животных отмечали увеличение общего числа лейкоцитов по сравнению со значениями бычков контрольной группы на 19,47 и 48 % соответственно. При ассоциативном течении болезни этот показатель был ниже, чем у здоровых животных, причем за счет уменьшения процента сегментоядерных нейтрофилов. На наш взгляд, снижение числа лейкоцитов при хронически протекающих ассоциациях гельминтозов может быть обусловлено как продолжительностью болезни, так и глубокими структурными поражениями клеток, что подтверждается результатами патоморфологических и гистологических исследований.
В лейкограмме крови бычков, зараженных трематодами, наблюдается левый сдвиг, что проявляется резким увеличением процента юных нейтрофилов в 2,23 раза при фасциолезе, в 4,18 раз при дикроцелиозе и в 8,13 раз при ассоциации указанных трематод. У зараженных гельминтами животных отмечают также увеличение палочкоядерных нейтрофилов на 1,75–6,45 %.
Таблица 1.
Гематологические показатели при трематодозах бычков
|
Группа |
Эритроциты, 10*12/л |
Гемоглобин, г/л |
Общее число лейкоци-тов, 109/л |
Нейтрофилы, % |
Эозино-филы, % |
Моно-циты, % |
Базо-филы, % |
Индекс сдвига ядра
|
||
|
юные |
палоч-коядерные |
Сегменто-ядерные |
||||||||
|
1 |
5,92±0,2*** |
74,27±4,58*** |
6,51±0,43 |
0,89±0,26 |
3,55±0,55 |
18,33±3,39 |
9,33±1,19** |
6,78±1,22 |
0 |
0,24 |
|
2 |
6,35±0,31* |
77,21±1,97*** |
8,07±0,44* |
1,67±0,21** |
5,33±0,56* |
18,67±1,17 |
5,0±1,09 |
7,33±0,92* |
0 |
0,37 |
|
3 |
4,98±0,22*** |
69,07±3,94*** |
5,45±0,68 |
3,25±1,60 |
8,25±1,80* |
24±3,89 |
5,25±1,65 |
6,75±1,89 |
0 |
0,48 |
|
4 |
7,75±0,31 |
110,83±5,39 |
5,96±0,62 |
0,40±0,24 |
1,8±0,37 |
28,6±2,29 |
3,4±1,36 |
3,6±1,08 |
0,2±0,21 |
0,08 |
Примечание. *Р < 0,05, **Р < 0,01, ***Р < 0,001 по сравнению с показателями контрольной группы.
Указанные изменения характерны для регенеративного сдвига ядра, при котором увеличивается число палочкоядерных и юных нейтрофилов на фоне повышения числа лейкоцитов, что является показателем активации деятельности костного мозга и наблюдается в основном при воспалительных процессах.
Это подтверждается расчетами индекса ядерного сдвига (И) нейтрофилов, которое выражает отношение суммы всех несегментированных форм нейтрофилов к сегментированным и определяется по формуле:
И = (М+Ю+П)/C,
где М – миелоциты; Ю – юные нейтрофилы; П – палочкоядерные; С – сегментоядерные нейтрофилы.
Так, у животных контрольной группы он равен 0,08, что соответствует предельным значениям и указывает на нормальные процессы восстановления клеток лимфоцитарного ряда.
У животных опытных групп этот индекс выше в 3–6 раз и при заражении печеночным сосальщиком равен 0,24, что соответствует легкой степени поражения, а при заражении трематодами вида Dicrocoeliumlanceatum и его ассоциации cFasciolahepatica достигает 0,37–0,48 и является показателем средней степени тяжести патогенного воздействия трематод.
На наш взгляд, существенные изменения в числе различных видов нейтрофилов обусловлено тканевой миграцией гельминтов.
Эозинофилы являются первичными эффекторными клетками, которые наиболее активно и действенно осуществляют борьбу с паразитами и одновременно участвуют в развитии иммунитета. Существенная их особенность – наличие на этих клетках рецепторов к кортикостероидным гормонам. Работами многих исследователей была установлена различная степень выраженности экспрессии этих рецепторов [8, 10].
По данным Джальчинова, Чистякова [4] с выраженностью экспрессии этих рецепторов тесным образом связана способность эозинофилов выделять различного рода медиаторы, содержащиеся в гранулах данных клеток. Центральное место в гранулах занимает базисный белок, составляющий 30 % от общего числа гранулярных протеинов. Кроме базисного белка, в гранулах эозинофилов, преимущественно с низкой плотностью, содержатся протеины. При различных патологических процессах, сопровождающихся повышенной экспрессией мембранных рецепторов эозинофилов, происходит активация последних, и клетки начинают выделять в большом количестве протеины, обладающие выраженной протеолитической активностью в отношении не только инородных субстанций, но и нормальных тканей.
Вместе с тем, рассматривать действие биологически активных веществ, выделяемых эозинофилами, только с отрицательных позиций было бы неверным [9], поскольку имеются доказательства литического эффекта базисного протеина на личинки некоторых паразитов (например, Schistosoma mansoni и др.).
Эозинофилия характерна для гельминтозов как проявление защитной аллергической реакции организма. Наши исследования подтвердили ярко выраженную эозинофилию, особенно при заражении фасциолами (повышение содержания почти в 2,6 раза). Увеличение числа моноцитов более чем в 2 раза указывает на начало развития восстановительных процессов в организме при хроническом течении паразитозов.
Результаты наших исследований показали, что при спонтанном заражении и хроническом течении фасциолеза, дикроцелиоза и их ассоциации наблюдается резкое уменьшение числа эритроцитов, что сопровождается снижением уровня гемоглобина в крови. При этом отмечают характерные для регенеративного сдвига ядра изменения, при которых увеличивается число палочкоядерных и юных нейтрофилов на фоне повышения общего числа лейкоцитов, что является показателем активации деятельности костного мозга и наблюдается в основном при воспалительных процессах. Увеличение числа моноцитов более чем в 2 раза указывает на начало развития восстановительных процессов в организме при хроническом течении паразитозов.
1. Абдуллаев Х. С. Формирование паразитарной системы в организме крупного рогатого скота и меры борьбы с паразитозами в Нечерноземной зоне Российской Федерации: автореф. дис. … д-ра вет. наук. - Иваново, 2007. - C. 26-27.
2. Васильев Ю. Г., Трошин Е. И., Любимов А. И. Ветеринарная клиническая гематология. - С.-П.: Лань, 2015. - С. 165-218.
3. Волков А. Х. Методы и средства борьбы с ассоциативными инвазионными болезнями крупного рогатого скота: дис... д-ра вет. наук. - Казань, 2000. - С. 69-130.
4. Джальчинова В. Б., Чистяков Г. М. Эозинофилы и их роль в патогенезе аллергических заболеваний. // Рос. вестник перинатологии и педиатрии. - 1999. - № 5. - С. 42-45.
5. Мазихова А. М., Беккиева С. А., Юсупов А. О., Чиляев С. Ш. Влияние трематодозных инвазий на морфологический состав крови крупного рогатого скота // Вестник КрасГАУ. - 2009. - № 4. - С. 163-164.
6. Петров Ю. Ф., Абдуллаев Х. С., Мухаммедов З. Р. и др. Динамика биохимических показателей при микстинвазии крупного рогатого скота. // Уч. Зап. КГАВМ. - Казань, 2006. - Т. 184. - С. 204-210.
7. Чухлебова О. М. Фармакологическая коррекция обменных процессов у крупного рогатого скота при гельминтозах и антигельминтной терапии: автореф. дис. … канд. вет. наук. - Воронеж, 2012. - С. 11-15.
8. Bush R. K., Geller M., Busse W. W. Response to corticosteroids in the hypereosinophilic syndrom. Arch. Intern. Med 1978; 138: 1244.
9. Buttervorth A. E., Sturrock R. F. Eosinophils as mediators antibodydependent damage to schistosomula. Nature 1975; 256: 727-729.
10. Prin L., Lefebvre P., Gruart V. Polinucleare eosinophile et recepteur glucocorticoide. Rev. Allergology. 1990; 30: 2: 83-85.
