КЛОНАЛЬНОЕ МИКРОРАЗМОЖЕНИЕ VACCINIUM CORYMBOSUM L. СОРТА БЛЮ БЕРРИ В КУЛЬТУРЕ ТКАНЕЙ
Аннотация и ключевые слова
Аннотация (русский):
Для эффективного микроразмножения Vaccinium corymbosum L. сорта Блю Берри были разработаны подходы поверхностной стерилизации эксплантов – апикальная часть стебля и сегменты стебля с использованием раствора коммерческого отбеливателя «Белизна» и подобраны питательные среды для культивирования эксплантов. Максимальная выживаемость эксплантов (100 %) наблюдалась при стерилизации 15 % раствором белизны с продолжительностью экспозиции 15 минут. Для эффективного размножения сравнивали питательные среды Мурасиге-Скуга, WPM и Андерсона. Наибольший коэффициент размножения голубики высокорослой был на среде WPM с добавлением зеатина и индолил-3-масляной кислоты. Максимальное количество пазушных побегов на эксплант составило 3,80 со средней длиной 3,26 см, полученных на среде WPM, содержащей 1,0 мг/л зеатина и 0,1 мг/л индолил-3-масляной кислоты. Было показано, что при увеличении числа пассажей показатели роста улучшаются. Максимальное увеличение количества здоровых пазушных побегов наблюдается на четвертом пассаже, тогда как с пятого пассажа начинает появляться феномен витрификации.

Ключевые слова:
Vaccinium corymbosum L., голубика высокорослая, in vitro, эксплант, сегменты стебля, среда WPM, апикальные части стебля, микроклональное размножение, сорт Блю Берри
Текст
Текст (PDF): Читать Скачать

Голубика высокорослая (Vaccinium corymbosum L.) является наиболее распространенным и коммерчески важными видом рода Vaccinium. В последние годы голубика ценится как пищевой продукт и лекарственное сырье [1]. В связи с этим наблюдается повышенный интерес к ее выращиванию среди производителей и потребителей во всем мире. Производство высококачественных растений, необходимых для создания насаждений, предполагает применение современных методов размножения. Традиционно голубику размножают классическими методами вегетативного размножения, т.е. зелеными и одревесневшими черенками, а также отводками. Однако эти методы размножения не особенно эффективны в отношении количества генерируемых побегов и получения здорового посадочного материала [2]. Сорт голубики «Блю Берри» характеризуется высоким содержанием витаминов и антиоксидантов. По химическому составу и устойчивости к неблагоприятным факторам среды он наиболее приближен к дикорастущим растениям, что позволяет получать гарантированный урожай при любой погоде.

Исходя из вышесказанного, целью исследования являлось определение оптимальной концентрации регуляторов роста растений и количество периодов пассажей для микроразмножения Vaccinium corymbosum L. сорта Блю Берри.

Условия, материалы и методы исследований. Все эксперименты проводили in vitro в контролируемых условиях. В качестве объекта использовали саженцы V. corymbosum сорта Блю Берри, полученные от компании Bekker в Казахстане. В качестве первичных эксплантов использовали апикальные части стебля и сегменты стебля из молодых, мягких и активно растущих побегов (рисунок 1).

Экспланты подвергали поверхностной стерилизации различными концентрациями (5, 10, 15 и 20 %) коммерческого раствора отбеливателя «Белизна», содержащего 5,25 % гипохлорида натрия (NaOCl) с экспозициями 5, 10, 15 и 20 минут. Каждая концентрация содержала три капли твин-80.  Затем промывали шесть раз стерильной дистиллированной водой для удаления всех следов дезинфицирующего средства. Далее сегменты стебля, содержащие почку, были разделены на отрезки равной длины до 0,5-0,8 см. Длина  апикальной части стебля составляла 0,3-0,5 см в длину.

 

Список литературы

1. Howell A.B. Update on health benefits of cranberry and blueberry // Acta Hort. - 2009. - Vol. 2. - №. 810. - P.779-84.

2. Вечернина Н.А., Таварткиладзе О.К., Эрст А.А., Горбунов А.Б. Ускоренное размножение голубики топяной in vitro // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2008. - Т. 44. - № 6. - С. 21-25.

3. Gajdošová A., Ostrolucká M.G., Libiaková G., Ondrušková E., Šimala D. Microclonal propagation of Vaccinium sp. and Rubus sp. and detection of genetic variability in culture in vitro // Journal of Fruit and Ornamental Plant Research. - 2006. - Vol. 14. - P. 103-119.

4. Webster S.K., Mitchell S.A., Ahmad M.H. A novel surface sterilization method for reducing microbial contamination of field grown medicinal explants intended for in vitro culture // Biotechnology Centre, U.W.I, Mona, Kingston. - 2003. - 7 - Jamaica, West Indies.

5. Mihaljević I., Dugalić K., Tomaš V., Viljevac M., Pranjić A., Čmelik Z., Puškar B., Jurković Z. In vitro sterilization procedures for micropropagation of ‘Oblačinska’ sour cherry // Journal of Agricultural Sciences. - 2013. - Vol. 58. - P. 117-126.

6. Mohamed G. R. A., Bautista H., Khusnetdinova L. Z., Timofeeva O. A. A research approach supporting micropropagation and domestication of blueberry (Vaccinium corymbosum L.) in Egypt // Eurasian Journal of Biosciences. - 2018. - Vol. 12. - №. 2. - P. 205-210.

7. CUCE M., SOKMEN A. In vitro production protocol of Vaccinium uliginosum L. (bog bilberry) growing in the Turkish flora // Turkish Journal of Agriculture and Forestry. - 2017. Vol. 41. - №. 2. - P. 294-304.

8. Agrawal V., Prakash S., Gupta S. Effective protocol for in vitro shoot production through nodal explants of Simmondsia chinensis // Biologia Plantarum. - 2002. - Vol. 45. - №.3. - P. 449-453.

9. Cappelletti R., Sabbadini S., Mezzetti B. The use of TDZ for the efficient in vitro regeneration and organogenesis of strawberry and blueberry cultivars // Scientia horticulturae. - 2016. - Vol. 207. - P. 117-124.

10. Retamales J.B., Hancock J.F. Blueberries, 2nd Edition. - 2018. - CABI.

11. Yavorska N., Lobachevska O., Kyyak N.Y. Microclonal propagation of the varieties of highbush blueberry Vaccinium corymbosum L. // Biotechnologia Acta. - 2016. - Vol. 9. - №. 5. - P.30-37.

12. Fira A., Clara D., Badescu C. Aspects regarding the in vitro propagation of highbush blueberry cultivar blue crop // Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca, Horticulture. - 2008. - Vol. 65. - №. 1. - P.104-109.

13. Jacygrad E., Ilczuk A., Mikos M., Jagiełło-Kubiec K. Effect of medium type and plant growth regulators on the in vitro shoot proliferation of Cotinus coggygria Scop. ‘Royal Purple’ // Acta Scientiarum Polonorum. Hortorum Cultus. - 2012. - Vol. 11. - №. 5. - P. 143-151.

14. Ostrolucká M. G., Gajdošová A., Libiaková G., Hrubíková K., Bezo M. Protocol for micropropagation of selected Vaccinium. In: Jain S.M.; Häggman (eds) Protocols for micropropagation of woody trees and fruits // Springer, Berlin. - 2007. - P. 445-455.

15. Arab M.M., Yadollahi A., Shojaeiyan A., Shokri S., Ghojah S.M. Effects of nutrient media, different cytokinin types and their concentrations on in vitro multiplication of G×N15 (hybrid of almond× peach) vegetative rootstock // Journal of Genetic Engineering and Biotechnology. - 2014. - Vol.12. - №. 2. - P.81-87.

16. Debnath S.C., Mcrae K.B. An efficient adventitious shoot regeneration system on excised leaves of micropropagated lingonberry (Vaccinium vitis-idaea L.) // The Journal of Horticultural Science and Biotechnolog. - 2002. - Vol. 77. - №. 6. - P. 744-752.

17. Meiners J., Schwab M., Szankowski I. Efficient in vitro regeneration systems for Vaccinium species // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 2007. - Vol. 89. - №. 2-3. - P. 169-176.

18. Tetsumura T., Matsumoto Y., Sato M., Honsho C., Yamashita K., Komatsu H., Sugimoto Y., Kunitake H.. Evaluation of basal media for micropropagation of four highbush blueberry cultivars // Scientia Horticulturae. - 2008. - Vol. 119. - №. 1. - P. 72-74.

19. Pereira M.J. Conservation of Vaccinium cylindraceum Smith (Ericaceae) by micropropagation using seedling nodal explants // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant. - 2006. - Vol. 42. - №. 1. - P. 65-68.

20. Debnath, S.C., McRae K.B. An efficient in vitro shoot propagation of cranberry (Vaccinium macrocarpon Ait.) by axillary bud proliferation. // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant. - 2001. - Vol. 37. - №. 2. - P. 243-249.

Войти или Создать
* Забыли пароль?