сотрудник
сотрудник
Россия
сотрудник
Россия
сотрудник
Россия
сотрудник
Россия
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
сотрудник
Россия
сотрудник
Россия
ГРНТИ 76.03 Медико-биологические дисциплины
ГРНТИ 76.33 Гигиена и эпидемиология
ОКСО 14.04.02 Ядерные физика и технологии
ОКСО 31.06.2001 Клиническая медицина
ОКСО 31.08.08 Радиология
ОКСО 32.08.12 Эпидемиология
ББК 51 Социальная гигиена и организация здравоохранения. Гигиена. Эпидемиология
ББК 534 Общая диагностика
ТБК 5708 Гигиена и санитария. Эпидемиология. Медицинская экология
ТБК 5712 Медицинская биология. Гистология
ТБК 5734 Медицинская радиология и рентгенология
ТБК 6212 Радиоактивные элементы и изотопы. Радиохимия
Цель: Изучение процессов регенерации при лечении местных лучевых поражений (МЛП) кожи мезенхимальными стволовыми клетками (МСК) слизистой ткани десны человека, культуральной средой (КС) и концентратом кондиционированной среды (ККС) на лабораторных животных. Материал и методы: В исследование включено 80 белых крыс-самцов линии Wistar массой 210 ± 30 г в возрасте 8–12 нед, рандомизированых случайным образом на 4 группы (по 20 животных в каждой): контроль (К), животные не получали терапию; контроль с введением концентрата культуральной среды (КС) трехкратно на 1, 14 и 21 сут; введение МСК в дозе 2 млн на 1 кг трехкратно на 1, 14 и 21 сут; введение ККС в расчетной дозе 2 млн клеток на 1 кг трехкратно на 1, 14 и 21 сут. Каждое лабораторное животное наблюдали 17 раз: на 1, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70, 77, 84, 91, 98, 105, 112-е сут после моделирования ожога. Проводили гистологическое (окраска гематоксилином-эозином) и иммуногистохимическое (СD31, СD68, VEGF) исследования. Моделирование МЛП проводили на рентгеновской установке в дозе 110 Гр. Культивировали МСК по стандартной методике до 3–5 пассажа, осуществляли забор кондиционированной среды и концентрировали ее в 10 раз. Иммунофенотип МСК (CD34, CD45, CD90, CD105, CD73, HLA-DR) и жизнеспособность (7‑ADD) определяли с помощью проточной цитофлуориметрии. Результаты: При планиметрической оценке измененной кожи животных на 7 сут в группе ККС площадь была достоверно больше по сравнению с группами К, МСК, КС (р ≤ 0,05). В группе КС на 14-е сут площадь открытой раневой поверхности и язвы с 28 до 42-х сут была достоверно меньше по сравнению с группами К, МСК и ККС (р ≤ 0,05). В группе К с 42 до 77-х сут наблюдения отмечалось увеличение площади язвы кожи по сравнению с группами КС и ККС (р ≤ 0,05). На 112-е сут полное заживление язвы кожи в группе КС отмечалось у 40 %, в группе МСК – у 60 %, а в группе ККС – лишь у 20 % животных, а в группе К не регистрировалось. Выраженная экспрессия маркера VEGF в эндотелиальных клетках и клетках стромы отмечалась в группах К и КС на 28-е сут и в группах МСК и ККС на 112-е сут. Заключение: Таким образом, все использованные методы лечения, включая 3-кратное введение КС, МСК и ККС в дозе 2 млн на 1 кг, были эффективны при МЛП кожи и приводили к сокращению площади поражения, ускоренному заживлению язвы, улучшению регенеративных процессов. Кроме того, применение МСК приводило к улучшению васкуляризации и уменьшению воспалительных процессов в очаге лучевого поражения.
мезенхимальные стволовые клетки, местные лучевые поражения, кондиционированная среда, клеточные технологии, рентгеновское излучение, кожа
1. Радиационная медицина. Руководство для врачей-исследователей и организаторов здравоохранения. Под ред. Л.А. Ильина. - М.: ИздАТ. 2001. Т. 2. 432 с.
2. Howpel J.W., Coggle J.E., Wells J. et al. The acute effects of different energy beta-emiters on pig and mouse skin // Drit. J. Radiobiology. 1968. Suppl. 19. P. 47-51.
3. Осанов Д.П. Дозиметрия и радиационная биофизика кожи. М.: Энергоатомиздат, 1983. 152 с.
4. Zheng K., Wu W., Jang S., et al. Bone marrow mesenchymal stem cell implantation for the treatment of radioactivity induced acute skin damage in rats // Molecular medicine reports. 2015. 12: 7065-7071.
5. Мороз Б.Б., Онищенко Н.А., Лебедев В.Г. и соавт. Влияние мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга на течение местных лучевых поражений у крыс после локального β-облучения // Радиац. биол. Радиоэкология. 2009. Т. 49. № 6. С. 688-693.
6. Котенко К.В., Еремин И.И., Мороз Б.Б., и соавт. Клеточные технологии в лечении радиационных ожогов: опыт ФМБЦ им. А.И. Бурназяна // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2012. Т. 7, №2: 97-102.
7. Темнов А.А., Астрелина Т.А., Рогов К.А., и соавт. Исследование влияния факторов кондиционной среды, полученной при культивировании мезенхимальных стволовых клеток костного мозга, на течение тяжелых местных лучевых поражений кожи у крыс // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2018. Т. 63. № 1. С. 35-39.
8. Kim H.S., Choi D.Y., Yun S.J. et al. Proteomic analysis of microvesicles derived from human mesenchymal stem cells // J. Proteome Res. 2012. Vol. 11. № 2. P. 839-849.
9. Daltro P.S., Barreto B.C., Silva P.G. et al. Therapy with mesenchymal stromal cells or conditioned medium reverse cardiac alterations in a high-fat diet-induced obesity model // The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy. 2017. 19: 1176-1188.
10. Gnecchi M., Zhang Z., Ni A., Dzau V.J. Paracrine mechanisms in adult stem cells signaling and therapy // Circ Res 2008. 103: 1204-1219.
11. Lee C., Shim S., Jang H., et al. Human umbilical cord blood-derived mesenchymal stromal cells and small intestinal submucosa hydrogel composite promotes combined radiation-wound healing of mice // The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy. 2017. 19 (9): 1048-1059.
12. Öksüz S., Şahin Alagöz M., Karagöz H., et al. Comparison of treatments with local mesenchymal stem cells and mesenchymal stem cells with increased vascular endothelial growth factor fxpression on irradiation injury of expanded skin // Ann. Plast. Surg. 2015. 75. P. 219-230.
13. Mitrano T.I., Grob M.S., Carrión F., et al. Culture and Characterization of Mesenchymal Stem Cells From Human Gingival Tissue // Journal of Periodontology. 2010. 81: 917-925.
14. Zhang Q.Z., Nguyen A.L., Yu W.H., Le A.D. Human oral mucosa and gingiva: a unique reservoir for mesenchymal stem cells // J Dent Res. 2012. 91(11) :1011-1018;
15. Duan H.G., Ji F., Zheng C.Q., et al. Conditioned medium from umbilical cord mesenchymal stem cells improves nasal mucosa damage by radiation // Biotechnol Lett. 2018. 40(6): 999-1007.
16. Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper-Cortenbach I., Marini F., Krause D. et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. // Cytotherapy. 2006. Vol. 8. P. 315-317.
